[发明专利]一种抗口腔致龋菌的多肽Pm8及制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，涉及Fmoc化学合成多肽，即一种抗口腔致龋菌的多肽Pm8及制备方法，该多肽具有抗口腔致龋菌能力，尤其是链球菌属的细菌。                                    

背景技术

虽然投入了大量的人力、物力，龋病（dental caries）仍然是世界性非传染性的三大疾病之一。龋病是在口腔内外环境中多种因素影响下，牙齿硬组织发生的一种慢性进行性破坏的细菌感染性疾病。变异链球菌和远缘链球菌是主要的致龋菌。1946年，McClure和Hewitt证实青霉素可以抑制大鼠龋病的发生，主要机理是抑制细菌细胞壁合成、抑制或干扰细菌的核酸和蛋白质的代谢与合成途径来达到抗菌的目的。然而这些传统抗生素容易诱使细菌发生突变而产生抗菌素的耐药性。因此，国内外学者一直致力于开发新型的抗菌素，而多肽是一段具有抗菌活性的短的氨基酸。 

鱼类具有强有力的天然免疫系统，从而能够应对大量的病原微生物。我们在之前已经证明了α螺旋线性阳离子多肽Pleurocidin（GWGSFFKKAAHVGKHVGKAALTHYL-NH₂）具有抗致龋菌、真菌的能力，并对变异链球菌生物膜有一定的抑制作用。但是pleurocidin的长度为25个氨基酸，过长的氨基酸提高了合成成本和对细菌生物膜的渗透能力，因此开发出新的短肽就更为必要。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗口腔致龋菌的多肽Pm8及制备方法，以克服天然抗菌肽长度过长，合成成本相对较高的问题。 

本发明采用的技术方案是：一种抗口腔致龋菌的多肽Pm8，其制备方法是：通过对天然多肽pleurocidin的活性中心的查找，对口腔常见致龋菌有一定的抗菌、杀菌能力，在确定活性中心的基础上，对其进行氨基酸的删除和替换形成新型的具有杀菌能力的抗菌多肽；所述新型抗菌多肽Pm8，序列为GWGKFFKKFFKFG。 

其制备方法中所述口腔常见致龋菌为变异链球菌。 

其制备方法中所述口腔常见致龋菌为远缘链球菌。 

其制备方法中所述口腔常见致龋菌为血链球菌。 

多肽使细菌细胞膜表面失去原有性状，变得粗糙甚至有出现孔隙，通过在细菌表面形成离子通道，引起细菌内容物的流出，从而导致了细菌的死亡。 

抗口腔致龋菌的多肽Pm1制备方法是，其特征在于：通过保持、改进α螺旋特性，对天然多肽pleurocidin活性中心氨基酸进行删除和替换，通过直接化学Fmoc合成的方法，构建有抗菌能力的多肽。 

本发明的特点是：发现并合成了新型的抗菌短肽。该多肽通过在细菌表面形成离子通道的原理来引起细菌的崩解、死亡。提高了合成成本和利用效率，从而更好的用于龋病的预防和治疗。本发明通过对天然多肽pleurocidin活性中心的删除和替换，构成了新的抗菌多肽。该多肽对口腔中的变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌都有一定的抗菌能力。多肽对细菌的最小抑菌浓度范围为8-32μg/ml，最小杀菌浓度范围为8-64μg/ml之间。多肽比天然多肽的长度更小，而抑菌、抗菌能力相当。本发明的多肽的抗菌原理为：多肽使细菌表面失去原有性状，变得粗糙甚至有出现孔隙；在细菌表面形成离子通道，引起细菌内容物的流出，从而导致了细菌的崩解、死亡；从而具有抗口腔致龋菌的能力。 

附图说明

以下结合附图和实施例对本发明做进一步的详细描述： 

图1是本发明中的多肽Pm11和Pm14的α螺线结构软件推测图；

图2是多肽处理细菌的电镜照片；

图3是多肽处理2个小时的结果；

图4是多肽处理2个小时的结果。

具体实施方式

一种抗口腔致龋菌的多肽Pm8，其制备方法是：通过对天然多肽pleurocidin的活性中心的查找，对口腔常见致龋菌有一定的抗菌、杀菌能力，在确定活性中心的基础上，对其进行氨基酸的删除和替换形成新型的具有杀菌能力的抗菌多肽；所述新型抗菌多肽Pm8，序列为GWGKFFKKFFKFG。 

其制备方法中所述口腔常见致龋菌为远缘链球菌。 

其制备方法中所述口腔常见致龋菌为血链球菌。 

多肽使细菌细胞膜表面失去原有性状，变得粗糙甚至有出现孔隙，通过在细菌表面形成离子通道，引起细菌内容物的流出，从而导致了细菌的死亡。