[发明专利]一种提高红麻子叶不定芽诱导率的方法

权利要求书

1.一种提高红麻子叶不定芽诱导率的方法，其特征在于，以红麻种子无菌苗子叶为外植体材料进行不定芽诱导、增殖，不定芽诱导培养基为：MS+0.1-3mg/L TDZ+ 0.01-1mg/L NAA+0.1-3mg/L AgNO₃，不定芽增殖培养基为：MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+100mg/L LH；以上不定芽诱导、增殖的培养条件均以光、暗培养时间分别为14h和10h循环进行、光照强度为20000LX、温度为26±1℃的条件进行培养。

2.根据权利要求1所述的提高红麻子叶不定芽诱导率的方法，其特征在于，所述方法的具体步骤包括：红麻种子经消毒、无菌处理后， 于MS培养基上进行光、暗培养，在光、暗培养时间分别为14h和10h循环进行、光照强度为20000LX、温度为26±1℃的条件下培养7-10d，然后将完整子叶切割成3-5×3-5mm²的长条接种在不定芽诱导培养基上培养30-40d，再将诱导培养后的子叶转接于不定芽增殖培养基中进行不定芽的增殖。

3.根据权利要求2所述的提高红麻子叶不定芽诱导的方法，其特征在于，增殖后产生的不定芽用于诱导植株再生，操作方法为：当不定芽生长至3-4cm时，将不定芽从外植体上切割下来，分割成单株的无根苗接种于不定芽生根培养基：MS+0.05mg/L NAA，诱导产生根，即可形成完整的植株。

4.根据权利要求1所述的提高红麻子叶不定芽诱导率的方法，其特征在于，所述不定芽诱导培养基的配制包括以下步骤：

（1）将MS中的大量元素、微量元素、铁盐、有机物以及蔗糖混合；

（2）加入TDZ、NAA,用蒸馏水定容，pH值用1mol/L NaOH调至5.8-6.0；

（4）溶液分装至锥形瓶中，加入琼脂粉；

（5）0.1Mpa、121℃高压灭菌20min；

（6）冷却至50-60℃，在超净工作台中操作，加入AgNO₃，然后分装到无菌的培养瓶中即为不定芽诱导培养基。

5.根据权利要求1所述的提高红麻子叶不定芽诱导率的方法，其特征在于，所述不定芽增殖培养基的配制包括以下步骤：

（1）    将MS中的大量元素、微量元素、铁盐、有机物以及蔗糖混合；

（2）    加入6-BA、IBA，用蒸馏水定容，pH值用1mol/L NaOH调至5.8-6.0；

（3）    溶液分装至锥形瓶中，加入琼脂粉；

（4）    0.1Mpa、121℃高压灭菌20min；

（5）    冷却至60℃左右，在超净工作台中操作，加入水解乳蛋白LH，然后分装到无菌的培养瓶中即为不定芽增殖培养基。

6.根据权利要求1所述的提高红麻子叶不定芽诱导率的方法，其特征在于，所述不定芽生根培养基的配制包括以下步骤：

（1）    将MS中的大量元素、微量元素、铁盐、有机物以及蔗糖混合；

（2）    加入NAA，用蒸馏水定容，pH值用1mol/L NaOH调至5.8-6.0；

（3）    将溶液分装至锥形瓶中，加入琼脂粉；

（4）    0.1Mpa、121℃高压灭菌20min；

（5）    冷却至60℃左右，在超净工作台中操作，将其分装到无菌的培养瓶中即为不定芽生根培养基。