[发明专利]门冬胰岛素前体基因的优化及其高效表达有效
| 申请号: | 201110322750.7 | 申请日: | 2011-10-21 |
| 公开(公告)号: | CN103060335B | 公开(公告)日: | 2017-06-09 |
| 发明(设计)人: | 徐岩;耿月兵;聂磊;王海彬;叶小红;白骅 | 申请(专利权)人: | 浙江海正药业股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/17 | 分类号: | C12N15/17;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/10;A61K38/28;A61P3/10;C12R1/84 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 318000 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 胰岛素 基因 优化 及其 高效 表达 | ||
1.一种密码子优化的门冬胰岛素前体基因序列,其特征在于,所述优化门冬胰岛素前体的基因为Sequence NO.5、Sequence NO.6、Sequence NO.7、Sequence NO.8、Sequence NO.9或Sequence NO.10之一。
2.根据权利要求1所述优化的门冬胰岛素前体基因在生产用于治疗糖尿病相关疾病药物中的用途。
3.一种表达载体,其特征在于,所述载体含有门冬胰岛素前体基因序列,其中基因序列选自Sequence NO.5、Sequence NO.6、Sequence NO.7、Sequence NO.8、Sequence NO.9或Sequence NO.10之一。
4.一种宿主细胞,其特征在于,所述细胞为毕赤酵母菌,且被权利要求3所述的表达载体所转化。
5.一种门冬胰岛素前体基因的改造方法,其特征在于包括以下步骤:
1)根据毕赤酵母偏好密码子对原基因序列进行优化,获得经过优化的门冬胰岛素前体基因序列Sequence NO.5、Sequence NO.6、Sequence NO.7、Sequence NO.8、Sequence NO.9或Sequence NO.10之一;
2)利用PCR技术合成经过优化的门冬胰岛素前体基因;
3)对经过优化的门冬胰岛素前体基因的进行鉴定;
4)经过优化的门冬胰岛素前体基因向酵母的转化及高效表达。
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