[发明专利]马钱子总碱的提取分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药有效成分的提取方法，特别是涉及一种从中药马钱子中提取马钱子总生物碱的方法，属于药物技术领域。

背景技术

马钱子又名番木鳖，始载于《本早纲目》，味苦，寒性，有大毒，归肝，脾经，功效为通络止痛，散结消肿。临床上用与风湿顽痹，麻木瘫痪，跌打损伤，痈疽肿痛，小儿麻痹后遗症，类风湿性关节炎等疾病；但具有剧毒的特性严重影响其在临床上的应用，所谓“毒药猛剂善起沉疴”。马钱子的治疗量为0.3-0.6g，过量易出现中毒，如何合理安全使用马钱子，成为近年的研究热点之一。

研究表明，总生物碱是马钱子中最主要的有效部位，包括马钱子碱、士的宁、番木鳖次碱、马钱子新碱、番木鳖甙、依卡精等，其中马钱子中的主要生物碱成分中马钱子碱具有抗炎、镇痛作用，而其中士的宁是中枢神经兴奋剂，主要在临床上治疗面瘫，神经麻痹等，同时其为主要的毒性成分，基本无抗炎、镇痛作用；文献报道小鼠灌服士的宁、马钱子碱、马钱子仁的LD50分别为3.27mg/kg、233mg/kg和234.5mg/kg；小鼠腹腔注射上述药物的LD50分别为1.53mg/kg、69.77mg/kg和76mg/kg，其口服中毒剂量成人为5～10mg，口服致死量为30mg。表明士的宁是马钱子中的主要毒性成分。有文献报道，分别用士的宁和马钱子碱给小鼠灌胃，两者的LD50分别为3.27mg/kg和233mg/kg，由此可以得知士的宁的安全性很低，如果能除去马钱子总生物碱中的部分士的宁，则既能降低其毒性，又能保留其原有的抗炎镇痛的药理活性，提高临床用药的安全性。因此，现代研究中需要一种能降低士的宁含量的马钱子总碱的提取方法。有文献报道，分别用士的宁和马钱子碱给小鼠灌胃，两者的LD50分别为3.27mg/kg和233mg/kg，由此可以得知士的宁的安全性很低，如果能除去马钱子总碱中的部分士的宁，则既能降低其毒性，又能保留其原有的抗炎镇痛的药理活性，提高临床用药的安全性。因此，现代研究中需要一种能降低士的宁含量的马钱子总碱的提取方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种安全、成本低、收率高、能有效降低士的宁含量的马钱子总生物碱的提取方法。主要是利用马钱子碱在多种溶剂中的溶解度大于士的宁，因此可以通过不同的溶剂提取达到马钱子碱和士的宁分离的效果。

本发明是通过以下技术方案实现的：

方法一：

(1)酸水提取-有机溶剂萃取法：取马钱子粉碎成粗粉，加酸液提取，合并提取液，过滤，滤液调整pH值至10-11，碱化后的溶液用有机溶剂萃取，合并萃取液，减压回收有机溶剂，并继续减压干燥，粉碎，即得马钱子总碱粗品；

(2)溶剂-分步萃取法：步骤(1)中得到的马钱子总碱粗品加溶剂溶解提取，提取液过滤，滤液加乙酸乙酯萃取，合并萃取液，减压回收乙酸乙酯，并继续减压干燥，粉碎，即得马钱子总碱。

方法二：

酸水提取-有机溶剂萃取法可以用醇提取-有机溶剂萃取法代替。

醇提取-有机溶剂萃取法步骤为：取马钱子粉碎成粗粉，加乙醇回流提取，合并提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，调整pH值至10-11，碱化后的溶液用有机溶剂萃取，合并萃取液，减压回收有机溶剂，并继续减压干燥，粉碎，即得马钱子总碱粗品。

纯化方法仍采用溶剂-分步萃取法，操作同方法一。

方法三：

酸水提取-有机溶剂萃取法还可以用碱化-有机溶剂萃取法代替。

碱化-有机溶剂萃取法步骤为：取马钱子粉碎成粗粉，加碱液提取，合并提取液，过滤，滤液用有机溶剂萃取，合并萃取液，减压回收有机溶剂，并继续减压干燥，粉碎，即得马钱子总碱粗品；其中，碱液是指氢氧化钙溶液、氢氧化钠溶液、碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液、稀氨水溶液中的一种。

纯化方法仍采用溶剂-分步萃取法，操作同方法一。

方法四：

溶剂-分步萃取法可以用硫酸盐-盐酸盐分步结晶法代替。

硫酸盐-盐酸盐分步结晶法步骤为：步骤(1)中得到的马钱子总碱粗品加硫酸盐，使士的宁形成结晶，滤除部分士的宁的母液加入盐酸形成马钱子碱盐酸盐，通过重结晶法纯化马钱子碱。

马钱子总碱粗品由上述方法一或方法二或方法三记载的方法得到。

基于上述工艺过程，发明人又进行了进一步的研究，细化各步骤的参数，从而筛选出最优方案，具体内容如下：