[发明专利]汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列及制备方法和应用无效

专利信息
申请号: 201110266160.7 申请日: 2011-09-08
公开(公告)号: CN102277442A 公开(公告)日: 2011-12-14
发明(设计)人: 戢福云;王长征;钱桂生;吴国明;李福祥;郑世珍;陈琰;贺武峰 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三军医大学第二附属医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C40B40/06;C40B50/06
代理公司: 重庆志合专利事务所 50210 代理人: 胡荣珲
地址: 400037 *** 国省代码: 重庆;85
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摘要:
搜索关键词: 汉族 人群 线粒体 dna 单倍型 检测 引物 阵列 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于:包括固相载体、滴加在该固相载体上的Q-PCR特异性引物以及在PCR反应体系中添加荧光物质,所述滴加在所述固相载体上的Q-PCR特异性引物具有SEQ ID NO:1-SEQ IDNO:16所示的寡核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于还包括滴加在该固相载体上的Q-PCR特异性引物作为阴性对照。

3.根据权利要求1所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于:所述固相载体为96孔PCR反应板。

4.根据权利要求1所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于:所述荧光物质为SYBR Green I。

5.权利要求1-4任一所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列的制备方法,其特征在于包含步骤:

1)采用亚磷酰胺三酯法合成SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:16所示的Q-PCR特异性引物;

2)将步骤1)中合成的Q-PCR特异性引物按浓度为100-300nM滴加到Q-PCR反应板中,制得所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其阴性对照孔含有Q-PCR特异性引物。

6.采用权利要求1-4任一所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列的检测方法,其特征在于有步骤:

1)制备Q-PCR的反应液;

2)将步骤1)制得的Q-PCR反应液滴加到本发明所述引物阵列的待测标本区;

3)DNA样品准备:抽提无降解、无蛋白质污染的DNA或通过紫外分光光度法检测的DNA,其OD260/OD280为1.8~2.0;

4)Q-PCR引物阵列的实时定量PCR检测。

7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于步骤1)中所述Q-PCR反应液为Q-PCR特异性引物的溶液,所述Q-PCR特异性引物的寡核苷酸序列如SEQ IDNO:1-SEQ ID NO:16所示。

8.权利要求1-4任一所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列在检测汉族人群线粒体DNA单倍型中的应用。

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