[发明专利]汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列及制备方法和应用无效
| 申请号: | 201110266160.7 | 申请日: | 2011-09-08 |
| 公开(公告)号: | CN102277442A | 公开(公告)日: | 2011-12-14 |
| 发明(设计)人: | 戢福云;王长征;钱桂生;吴国明;李福祥;郑世珍;陈琰;贺武峰 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三军医大学第二附属医院 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C40B40/06;C40B50/06 |
| 代理公司: | 重庆志合专利事务所 50210 | 代理人: | 胡荣珲 |
| 地址: | 400037 *** | 国省代码: | 重庆;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 汉族 人群 线粒体 dna 单倍型 检测 引物 阵列 制备 方法 应用 | ||
1.一种汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于:包括固相载体、滴加在该固相载体上的Q-PCR特异性引物以及在PCR反应体系中添加荧光物质,所述滴加在所述固相载体上的Q-PCR特异性引物具有SEQ ID NO:1-SEQ IDNO:16所示的寡核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于还包括滴加在该固相载体上的Q-PCR特异性引物作为阴性对照。
3.根据权利要求1所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于:所述固相载体为96孔PCR反应板。
4.根据权利要求1所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其特征在于:所述荧光物质为SYBR Green I。
5.权利要求1-4任一所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列的制备方法,其特征在于包含步骤:
1)采用亚磷酰胺三酯法合成SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:16所示的Q-PCR特异性引物;
2)将步骤1)中合成的Q-PCR特异性引物按浓度为100-300nM滴加到Q-PCR反应板中,制得所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列,其阴性对照孔含有Q-PCR特异性引物。
6.采用权利要求1-4任一所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列的检测方法,其特征在于有步骤:
1)制备Q-PCR的反应液;
2)将步骤1)制得的Q-PCR反应液滴加到本发明所述引物阵列的待测标本区;
3)DNA样品准备:抽提无降解、无蛋白质污染的DNA或通过紫外分光光度法检测的DNA,其OD260/OD280为1.8~2.0;
4)Q-PCR引物阵列的实时定量PCR检测。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于步骤1)中所述Q-PCR反应液为Q-PCR特异性引物的溶液,所述Q-PCR特异性引物的寡核苷酸序列如SEQ IDNO:1-SEQ ID NO:16所示。
8.权利要求1-4任一所述的汉族人群线粒体DNA单倍型检测引物阵列在检测汉族人群线粒体DNA单倍型中的应用。
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