[发明专利]一种利用线粒体内膜表达变形紫色红质筛选淬灭自由基的活性物质和抗衰老产品的方法

权利要求书

1.在体外培养的动物细胞内表达变形紫色红质，使其定位在线粒体内膜上。在光照条件下培养上述细胞，并且在培养基中加入待测物质，检测该物质抑制细胞凋亡的效果和活性。

2.权限1中的动物细胞是原代细胞或细胞株，包括人胚肾细胞株HEK293。

3.权限1中变形紫色红质的人造基因是

5‘-G

GGG AAT TCG CGG CCG CTT CTA GAG TAA ACC ACC ATG CTT GCC ACT AGG GTG TTC AGT CTG GTC

GGG AAA CGG GCA ATT TCT ACC AGC GTC TGT GTG AGA GCC GGC GGA GGC GAT TTG GAC GCT TCT

GAT TAT ACA GGA GTG AGT TTT TGG TTG GTC ACC GCA GCT CTT TTG GCG TCG ACA GTG TTT TTC

TTT GTG GAG AGG GAC CGC GTA TCA GCA AAA TGG AAG ACC TCC TTG ACT GTT AGT GGC CTC GTC

ACA GGA ATA GCT TTT TGG CAC TAT ATG TAC ATG AGG GGC GTT TGG ATC GAA ACG GGA GAT TCC

CCC ACA GTT TTT AGG TAT ATC GAC TGG CTC CTT ACT GTC CCC TTG CTG ATT TGT GAG TTC TAT

TTG ATC TTA GCC GCT GCA ACC AAT GTG GCT GGA TCA CTG TTC AAG AAA TTG TTG GTG GGG TCC

TTA GTG ATG TTG GTG TTC GGT TAC ATG GGC GAA GCT GGA ATC ATG GCA GCC TGG CCA GCC TTT

ATT ATC GGC TGC CTC GCC TGG GTA TAT ATG ATA TAC GAG CTC TGG GCA GGC GAA GGA AAG AGT

GCT TGC AAC ACA GCT AGC CCT GCG GTC CAG TCG GCC TAC AAC ACA ATG ATG TAT ATT ATC ATC

TTC GGC TGG GCG ATA TAT CCT GTG GGC TAC TTC ACC GGT TAC TTG ATG GGC GAC GGG GGA AGT

GCG CTT AAT TTA AAC CTT ATT TAT AAC CTC GCC GAT TTC GTG AAC AAA ATT TTA TTT GGC CTG

ATT ATC TGG AAC GTC GCT GTC AAA GAA TCA AGC AAC GCC TAA TAG TGA GGA TCC ACT AGT AA-3‘。

4.权限1中表达变形紫色红质基因的方式是将该基因克隆入表达载体质粒，比如pSG5质粒，或BABE反转录表达质粒，然后使用转染方法，比如脂质体介导的方法导入细胞。如使用反转录载体，可以筛选整合该基因和带抗性基因的细胞克隆。该基因可以在细胞内短时间或长时间表达。

5.权限1中光照条件为可见光，光强范围1-5000lux。最适光强范围25-1000lux。

6.权限1中光照时间为12小时至14天。最适光照时间为24小时至7天。

7.权限1中待测化合物是天然产物或合成化合物。使用权限1筛出的阳性物质包括维生素C，叔丁基对苯二酚(TBHQ)。

8.使用权限1筛选出的阳性物质，可以用于抗衰老和治疗衰老引起的疾病，包括神经退行性疾病。