[发明专利]碱性成纤维细胞生长因子结合短肽衍生物及其应用

说明书

技术领域：

本发明属于药物化学、多肽生物技术领域，涉及能结合碱性成纤维细胞生长因子的短肽衍生物，具体涉及其序列、在基础研究和医药领域方面的应用。

背景技术：

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF，或FGF2)结合和激活相应受体(FGFR)，在促有丝分裂和非促有丝分裂生物学功能方面起重要作用。但相继发现结肠癌、前列腺癌、纤维瘤、横纹肌肉瘤、神经胶质瘤、黑色素瘤等多种肿瘤与与bFGF表达的异常上调密切相关。因此，bFGF被视为肿瘤等疾病的治疗靶标之一而备受关注。以bFGF为靶标的拮抗药物能阻断bFGF的信号传递，抑制肿瘤组织新生血管的生成，抑制肿瘤细胞等的生长、分裂和转移，从而达到治疗相关肿瘤的目的。

作用于bFGF的抑制剂主要是带负电荷的有机小分子和寡糖类拮抗剂，如Suramin、PI-88和PNU145156E等，它们主要是模拟肝素，通过分子上的负电荷和bFGF上的带正电荷的碱性氨基酸位点以氢键结合等作用，这些位点主要是bFGF表面上肝素结合位点(Arg121、Lys126、Asn28)和受体结合位点(Arg108)两个区域。而人体内多种蛋白表面都带正电荷，也可能会与这些拮抗剂作用，因此它们的特异靶向性差，毒副作用大，至今无此类拮抗剂药物上市。

而肽类拮抗剂药物相对于以上有机小分子拮抗剂药物来讲，具有活性高、用药剂量小、毒副作用低、代谢终产物为氨基酸等多种优点，因此已经成为研究的热点。已经有多种小肽以及肽衍生物药物上市，例如在SARS期间作为预防和治疗药物的胸腺五肽和在生长抑素基础上改造的抗肿瘤药物奥曲肽等。有关bFGF的肽类拮抗剂报道极少，尚未发现其肽衍生物类拮抗剂的报道。目前FGFR抑制剂方面国外相关专利有：US 2002/0119931 A1。国内相关专利有：201010525954.6。相比生长抑制素、催产素等其它研究比较成熟的小肽类药物来说，bFGF肽类拮抗药物还处于非常年轻的上升阶段，有很大的开拓空间。而bFGF与一些疾病的相关性以及bFGF拮抗剂对相关疾病的治疗潜能，预示着bFGF拮抗肽抑制剂的研究有着非常诱人的前景。

发明内容：

本发明的目的在于提供了bFGF的结合短肽衍生物，可应用于bFGF与其受体相互作用研究方面的应用，主要是在药物方面的应用，尤其是在治疗与体内bFGF高表达相关肿瘤疾病方面的应用。

具体而言，本发明所指bFGF结合短肽衍生物，其序列为N’-PILQAGLGGGS-NH₂-C’，其对应的三字符序列为，N’-Pro-Ile-Leu-Gln-Ala-Gly-Leu-Gly-Gly-Gly-Ser-NH₂-C’，其C末端丝氨酸的羧基被酰胺化，所述氨基酸残基可以指L-型的氨基酸，也可以指D-型的氨基酸，其中本发明实施例中所述P15为其全部残基为L-型氨基酸的短肽衍生物。

本发明所指“bFGF的结合短肽衍生物N’-PILQA GLGGGS-NH₂-C’”的衍生物，包括但不限于以下所述衍生化而成的肽衍生物：①将其中一个或几个氨基酸残基替换成与其侧链性质相似的氨基酸；②将其中一个或几个编码氨基酸残基替换成非编码氨基酸，包括但不限于D-型氨基酸或β-氨基酸或N-甲基氨基酸；③N末端氨基基团的修饰包括但不限于脱-氨基、N-低级烷基、N-二-低级烷基和N-酰基修饰；④C末端羧基基团的修饰包括但不限于酰胺、或低级烷基酰胺、或肽醇化、或二烷基酰胺、或低级烷基酯修饰、或连接其它基团成肽缀合物；⑤同时进行①、②、③、④中的任意两种或任意三种或同时四种衍生化。

N’-PILQA GLGGGS-NH₂-C’的衍生物优选以下但不限于以下衍生物，其序列为N’-PLLQA TA GGGS-NH₂-C’，其对应的三字符序列为N’-Pro-Leu-Leu-Gln-Ala-Thr-Ala-Gly-Gly-Gly-Ser-NH₂-C’，其全部残基为L-型氨基酸，C末端丝氨酸的羧基被酰胺化，在实施例中该肽衍生物命名为P21。

本文中“药学上可接受的酯”指对氨基酸侧链基团的修饰，包括但不限于苏氨酸、丝氨酸侧链羟基与羧酸发生酯化反应后的产物。