[发明专利]一种小麦成熟胚培养及再生的方法无效
| 申请号: | 201110196692.8 | 申请日: | 2011-07-14 |
| 公开(公告)号: | CN102283123A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
| 发明(设计)人: | 蒋苏;马鸿翔;张旭;余桂红;孙晓波;魏芳 | 申请(专利权)人: | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 孙忠浩 |
| 地址: | 210014 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 小麦 成熟 培养 再生 方法 | ||
1.一种小麦成熟胚培养及再生的方法,其特征在于,再生培养基以MS基本培养基为基础,添加麦芽糖,MES,KT,NAA,再生培养基中麦芽糖的浓度为40g/L,MES浓度为1.95g/L,KT为5mg/L,NAA为0.1mg/L,pH=5.8;小麦成熟胚培养及再生的具体方法为:
a)挑选成熟饱满的小麦种子,用70%酒精浸泡5min,0.1%HgCl2灭菌20min,至少用无菌水冲洗4次后,再用无菌水浸泡19~24h,剥取种子的成熟胚;
b)将浸泡后种子的成熟胚去掉胚芽胚根后纵切,接入诱导培养基中,23~25℃暗培养,10~14天继代一次,共诱导培养20~28天,获得小麦成熟胚愈伤组织;
c)将小麦成熟胚愈伤组织转入上述配制好的再生培养基中,23~25℃光照培养,25~30天,诱导小麦成熟胚愈伤组织分化,形成再生植株苗。
2.根据权利要求1所述的一种小麦成熟胚培养及再生的方法,其特征在于,所述的诱导培养基使用MS基本培养基的大量元素、微量元素和铁盐,与B5基本培养基的维生素成分进行复合,再添加麦芽糖,MgCl2,水解酪蛋白,谷氨酰胺,MES,其中,麦芽糖的浓度为40g/L,MgCl2的浓度为0.75g/L,水解酪蛋白的浓度为500mg/L,谷氨酰胺浓度为300mg/L,所述培养基中MES浓度为1.95g/L,pH=5.8。
3.根据权利要求1所述的一种小麦成熟胚培养及再生的方法,其特征在于,所述的23~25℃光照培养是指:在培育期期内,以环境温度23~25℃,光照和黑暗每12h相间交替,光照强度2000lux。
4.根据权利要求1或2所述的一种小麦成熟胚培养及再生的方法,其特征在于,小麦成熟胚愈伤组织诱导率至少为98%,小麦成熟胚愈伤组织分化率为23~50%。
5.根据权利要求3所述的一种小麦成熟胚培养及再生的方法,其特征在于,将分化出的再生植株苗接入1/2MS培养基中,按照传统方法进行壮苗培养。
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