[发明专利]吉林枝芽孢杆菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，涉及一种能耐盐的新的细菌及其应用，具体涉及吉林枝芽孢杆菌及其应用。

背景技术

土壤盐渍化是限制农作物生长、发育和产量最严重的非生物胁迫之一。我国近1/5耕地发生盐碱化，盐碱地改良利用技术的发展，对于我国尤其是内陆干旱农业灌区农村经济持续健康发展、国土治理、生态环境保护等具有极其重要的现实意义。目前改良盐碱地的主要措施有：工程措施、水利措施、生物措施和农业措施等。其中生物改良主要包括种植耐盐植物和使用微生物菌肥等。

近年来，国内外许多学者尝试盐碱地土壤中分离得到耐盐细菌，并对其耐盐机制进行研究。目前对革兰氏阳性菌的研究主要集中于枯草芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌。

芽孢杆菌广泛分布于自然界中，由于其产生芽孢而具有极强的抗逆性。本研究从土壤中分离筛选一株新的枝芽孢菌耐盐菌株，并对其耐盐性质进行了研究。这为下一步耐盐微生物菌剂的研究与开发打下基础；并且可能用于耐盐基因的克隆及转基因耐盐植物的开发。

发明内容

为了开发新的耐盐细菌资源，本发明的目的在于提供一种能耐盐的新的细菌——吉林枝芽孢杆菌。

该菌命名为吉林枝芽孢杆菌(Virgibacillus jilinensis GIMN1.014^T)，保藏编号为CCTCC NO.M2011164。

本发明所述的吉林枝芽孢杆菌是从吉林西部的盐碱土壤中采集，经实验室分离培养获得的。该菌培养条件为：

(1)培养基：采用牛肉膏蛋白胨培养基。

具体配方为：牛肉膏10g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂20g，水1000ml，pH 7.0；

(2)培养温度：30℃。

本发明吉林枝芽孢杆菌(Virgibacillus jilinensis GIMN1.014^T)的分子分类地位的确定。

该菌株的16S rRNA序列登陆号为HQ693527，其16S rRNA序列如SEQ ID NO：1所示。

测序结果与GenBank数据库中的已知序列进行BLAST比较，确定与本发明菌株亲缘关系最近的种属。从数据库获得相关种属的16S rRNA序列，构建系统发育树。

吉林枝芽孢杆菌的16S rRNA基因序列与菌株Virgibacillus carmonensis LMG 20964^T只有94.9％的同源性，本发明与其同源性最高的枝芽孢杆菌菌株微生物学特性的比较见表1。

表1吉林枝芽孢杆菌与其同源性最高的枝芽孢杆菌菌株微生物学特性比较

注：+，阳性；-，阴性；+/-，弱阳性；NA，无可取数据

由于本发明与同源性最高的菌株Virgibacillus carmonensis LMG20964^T之间在H₂S的产生，D-半乳糖、D-葡萄糖、D-果糖、棉子糖和D-蜜二糖的利用上存在明显不同，而且16S rRNA基因序列同源性只有94.9％。一般情况下，16S rRNA基因序列同源性小于97.0％的细菌，其DNA-DNA杂交率不会大于70％(Stackebrandt & Goebel，1994)，因此无需进行DNA-DNA杂交率实验。根据1987年国际系统微生物委员会ICSB规定，DNA同源性小于70％或者杂交分子的热解链温度差小于或等于2℃为细菌种的界限(Wayne et al，1987)，因此本发明的细菌为一种新的细菌，命名为吉林枝芽孢杆菌(Virgibacillus jilinensis GIMN1.014^T)。

本发明吉林枝芽孢杆菌具有以下有益效果：

本发明吉林枝芽孢杆菌具有耐盐的能力，具有较大的研究价值。

本发明吉林枝芽孢杆菌(Virgibacillus jilinensis GIMN1.014^T)已于2011年5月10日保藏于国家知识产权局指定的保藏单位中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M2011164。

附图说明

图1是本发明吉林枝芽孢杆菌的透射电子显微镜照片(2500倍)；

图2是本发明吉林枝芽孢杆菌及部分相关菌株依据16S rRNA序列构建的系统发育树。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行更详尽的说明。

实施例1：本发明吉林枝芽孢杆菌的分离