[发明专利]一种黄酒生产过程质量控制快速检测方法

说明书

技术领域

本发明属于食品分析和食品安全技术领域，涉及一种同时测定黄酒中氨基甲酸乙酯及其前体物质——尿素的高效液相色谱(HPLC)方法。

背景技术

氨基甲酸乙酯(简称EC，又称脲烷)是一种具有基因致癌作用的物质，能够导致肺肿瘤、淋巴癌、肝癌、皮肤癌等。世界卫生组织国际癌症研究机构已将EC归为2A类致癌物。EC是烟草叶及香烟的天然成分，也是发酵食品(如面包，酸牛奶，乳酪等)和酒精饮料(如葡萄酒，苹果酒，中国黄酒和日本清酒等)的伴随产物。世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)食品添加剂专业委员会(JECFA)已于2005年对EC进行了系统评估，认为EC对人的危害主要来自酒精饮料的饮用。建议各国采取有效措施控制酒类产品中EC含量，保护消费者健康。研究认为，尿素是发酵酒中形成EC的主要前体物质之一，黄酒中90％的EC就是通过尿素与乙醇反应生成，黄酒中尿素含量水平直接关系到黄酒产品中EC的含量水平，控制黄酒中尿素的含量是控制EC含量的关键。

由于黄酒中成分复杂，增加了EC和尿素的检测难度。传统的固相萃取-气相色谱/质谱联用(SPE-GC/MS)技术已成为美国分析化学师协会(AOAC)、欧盟以及国际葡萄与葡萄酒局(OIV)饮料酒中EC的标准检测方法，但该法样品前处理复杂、耗时且成本较高，难以适应实验室常规检测要求。近年来，有学者开发出利用高效液相色谱测定黄酒中EC的方法。

目前，国内关于尿素的测定方法一般有四种。一是分光光度法；二是化学比色法；三是脲酶法；四是红外技术，但这些方法灵敏度均较低且易受其他成分干扰。以分光光度法为例，具有与尿素类似结构的瓜氨酸会直接影响定量结果；而脲酶法，黄酒中铵离子含量会直接影响到黄酒尿素含量的准确测定。故上述检测方法不适用于酒类中尿素的测定。AOAC推荐的尿素检测方法是通过测定尿素与9-羟基吨反应生成的二黄质基脲，溶于50％硫酸溶液后形成的黄色溶液的吸光度，进而确定尿素的含量。另外，国外P.Herbert等人建立了手动衍生利用HPLC测定葡萄酒中尿素含量的方法。Shona Clark等人在此基础上，建立了自动衍生HPLC测定葡萄酒中尿素含量的方法。

HPLC技术是近年来发展较快的一种食品分析和食品安全检测方法，在食品科学领域中应用越来越广泛。尿素作为黄酒生产中一项安全控制指标，对控制黄酒中EC含量十分关键。黄酒中EC和尿素的含量已成为黄酒生产中涉及食品安全的重要监测指标。在黄酒安全生产质量监控中，EC和尿素是两项非常重要的安全指标，目前主要采用HPLC或GC/MS方法分别测定的，但这对生产企业来讲，无论是在检测设备的投入还是检测人员的投入都面临很大压力。因此，建立一种能够同时检测黄酒中EC和尿素的快速、有效且易于推广的方法十分必要。

引证文献：

[1]FSANZ.Ethyl Carbamate in Australian foods.Survey sampling and analysis conducted 2007.

[2]EFSA.Ethyl Carbamate and hydrocyanic acid in food and beverages-Scientific opinion of the panel on contaminants，2008.

[3]Shona Clark，Paul S.Francis，Xavier A.Conlan，Neil W.Barnett，Determination of urea using high-performance liquid chromatography with fluorescence detection after automated derivatisation with xanthydrol，J.Chromatography A，1161(2007)207-213.

[4]夏艳秋，朱强，汪志君.谨防黄酒中氨基甲酸乙酯的危害.酿酒，2004，31(3)：51-53.

[5]王晓娟，王德良等.降低发酵酒中尿素含量的研究进展.酿酒科技，2009，(2)：93-95.

[6]王晓娟，傅力等.高效液相色谱测定黄酒中尿素的含量.食品工业科技，2009，(5)：317-319.

发明内容