[发明专利]人类乳头瘤病毒核酸基因扩增和分型的方法以及用于该方法的检测试剂盒有效
| 申请号: | 201110146454.6 | 申请日: | 2011-06-02 |
| 公开(公告)号: | CN102251056A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
| 发明(设计)人: | 张宇杲 | 申请(专利权)人: | 江阴泰康生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
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| 地址: | 214445 江苏省江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 人类 乳头 病毒 核酸 基因 扩增 方法 以及 用于 检测 试剂盒 | ||
1.一种人类乳头瘤病毒核酸基因扩增和分型的方法,其特征在于使用混合引物对生物样本中的人类乳头瘤病毒核酸进行多重实时荧光定量基因扩增,使用定量荧光探针或荧光染料对人类乳头瘤病毒高危亚型进行定量测定,同时还使用分型荧光探针对HPV 16、18亚型进行分型鉴定。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述的基因扩增方法为使用DNA聚合酶的方法。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于所述的混合引物为序列SEQ.ID.NO:1-26的核酸的混和物。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于所述的定量探针为序列SEQ.ID.NO:27-39的核酸,其末端使用荧光基团标记。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于所述的分型探针为序列SEQ.ID.NO:40-41的核酸,其末端使用区别于定量探针的其它波长的荧光基团标记。
6.一种如权利要求1所述方法的试剂盒,包含宫颈刷、样本保存管、样本保存液、DNA提取试剂、引物、探针、Taq酶、反应缓冲液以及对照标准品,其特征在于:其中的引物为用于QPCR扩增HPV高危亚型E1区的引物、其中的探针为用于QPCR扩增HPV高危亚型E1区的探针和用于QPCR分型鉴定HPV 16、18亚型E1区的探针。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于所述的用于QPCR扩增HPV高危亚型E1区的引物包括序列SEQ.ID.NO:1-26。
8.根据权利要求6或7所述的试剂盒,其特征在于所述的用于QPCR扩增HPV高危亚型E1区的探针包括序列SEQ.ID.NO:27-39。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于所述的用于QPCR分型鉴定HPV 16、18亚型E1区的探针包括序列SEQ.ID.NO:40-41。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,其特征在于所述的标准对照为含有16、18亚型E1区基因的重组质粒的梯度稀释物。
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