[发明专利]一种降解叶绿素的菌株及降解方法有效
| 申请号: | 201110133856.2 | 申请日: | 2011-05-20 |
| 公开(公告)号: | CN102286382A | 公开(公告)日: | 2011-12-21 |
| 发明(设计)人: | 郝再彬;陈志良;王彦超;李海云;张会香 | 申请(专利权)人: | 桂林理工大学 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/66 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 541004 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 降解 叶绿素 菌株 方法 | ||
1.一种降解叶绿素的菌株,其特征在于菌株在土豆琼脂培养基上菌落最初为白色绒毛状,后变为绿色、暗绿色,外观呈绒毛状。在显微镜下观察此菌株的孢子梗没有分支,孢子梗顶端膨大为近似圆状形,另外还能发现它的无形繁殖不产生次生小柄,分生孢子主要集中在孢子梗的上半部并且成串珠状散开,分生孢子呈圆形或卵圆形以扇形状生长,中国典型培养物保藏中心确定的名称为:曲霉GLHZB319即Aspergillus GLHZB319,保藏号CCTCC NO:M2011101。
2.根据权利要求1所述的菌株的制备方法,其特征在于具体步骤为:
取有落叶的土壤0.50-2.00g,加入盛有25mL无菌水的三角瓶中,振荡1-3min,使土壤均匀分散后得到土壤悬浮液;吸取土壤悬浮液3-5滴,滴于用80%丙酮提取的单一叶绿素和琼脂配制的平板培养基上,用涂布环涂布均匀,30℃恒温培养2-4d后检查平板培养结果;能在平板上生长并产生透明圈的菌株,将再用80%丙酮提取的单一叶绿素水溶液中的发酵效果来进一步确认,发酵条件:温度30℃、自然pH、转速100r/min,发酵效果最好的为曲霉GLHZB319菌株。
3.一种利用权利要求1或2所述菌株降解叶绿素的方法,其特征在于具体步骤为:
(1)称取去皮土豆200.00g,并将土豆切成1-3cm的方块,加水1L后加热煮沸30min,之后冷却至室温;用三层纱布过滤,定容滤液至1L;
(2)取出步骤(1)的滤液0.1L于250ml的三角瓶中,向瓶内加入1.50-2.00g的琼脂粉,用牛皮纸包扎瓶口,在1.103MPa、121℃下灭菌20min,取出后迅速倒入玻璃培养皿内,加盖;待琼脂凝固后为固体培养基,然后在无菌条件下接入曲霉GLHZB319菌株,在30℃的生化培养箱中培养一周后放置在4℃冰箱保藏;
(3)将步骤(1)剩余的0.9L滤液转移至1.5L锥形瓶内,用牛皮纸包扎瓶口,在灭菌锅中灭菌20min,得到发酵培养基;
(4)在无菌条件下,用打孔器在步骤(2)的产物上打孔一个,接种到从步骤(3)制得发酵培养基中,在30℃下摇床振荡发酵培养2-3天后为发酵液;曲霉GLHZB319菌株小饼:直径0.6cm,厚度0.3-0.6cm,摇床振荡速度100r/min;
(5)取附有叶绿素的植物8-10.00g,于250mL的三角瓶内,将步骤(4)得到的发酵液0.1L倒入瓶内,用牛皮纸包扎瓶口;在振荡速度为100r/min摇床上振荡培养1天,植物上的叶绿素即被完全降解。
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