[发明专利]一种降解叶绿素的菌株及降解方法有效

专利信息
申请号: 201110133856.2 申请日: 2011-05-20
公开(公告)号: CN102286382A 公开(公告)日: 2011-12-21
发明(设计)人: 郝再彬;陈志良;王彦超;李海云;张会香 申请(专利权)人: 桂林理工大学
主分类号: C12N1/14 分类号: C12N1/14;C12R1/66
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 541004 广西壮族*** 国省代码: 广西;45
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摘要:
搜索关键词: 一种 降解 叶绿素 菌株 方法
【权利要求书】:

1.一种降解叶绿素的菌株,其特征在于菌株在土豆琼脂培养基上菌落最初为白色绒毛状,后变为绿色、暗绿色,外观呈绒毛状。在显微镜下观察此菌株的孢子梗没有分支,孢子梗顶端膨大为近似圆状形,另外还能发现它的无形繁殖不产生次生小柄,分生孢子主要集中在孢子梗的上半部并且成串珠状散开,分生孢子呈圆形或卵圆形以扇形状生长,中国典型培养物保藏中心确定的名称为:曲霉GLHZB319即Aspergillus GLHZB319,保藏号CCTCC NO:M2011101。

2.根据权利要求1所述的菌株的制备方法,其特征在于具体步骤为:

取有落叶的土壤0.50-2.00g,加入盛有25mL无菌水的三角瓶中,振荡1-3min,使土壤均匀分散后得到土壤悬浮液;吸取土壤悬浮液3-5滴,滴于用80%丙酮提取的单一叶绿素和琼脂配制的平板培养基上,用涂布环涂布均匀,30℃恒温培养2-4d后检查平板培养结果;能在平板上生长并产生透明圈的菌株,将再用80%丙酮提取的单一叶绿素水溶液中的发酵效果来进一步确认,发酵条件:温度30℃、自然pH、转速100r/min,发酵效果最好的为曲霉GLHZB319菌株。

3.一种利用权利要求1或2所述菌株降解叶绿素的方法,其特征在于具体步骤为:

(1)称取去皮土豆200.00g,并将土豆切成1-3cm的方块,加水1L后加热煮沸30min,之后冷却至室温;用三层纱布过滤,定容滤液至1L;

(2)取出步骤(1)的滤液0.1L于250ml的三角瓶中,向瓶内加入1.50-2.00g的琼脂粉,用牛皮纸包扎瓶口,在1.103MPa、121℃下灭菌20min,取出后迅速倒入玻璃培养皿内,加盖;待琼脂凝固后为固体培养基,然后在无菌条件下接入曲霉GLHZB319菌株,在30℃的生化培养箱中培养一周后放置在4℃冰箱保藏;

(3)将步骤(1)剩余的0.9L滤液转移至1.5L锥形瓶内,用牛皮纸包扎瓶口,在灭菌锅中灭菌20min,得到发酵培养基;

(4)在无菌条件下,用打孔器在步骤(2)的产物上打孔一个,接种到从步骤(3)制得发酵培养基中,在30℃下摇床振荡发酵培养2-3天后为发酵液;曲霉GLHZB319菌株小饼:直径0.6cm,厚度0.3-0.6cm,摇床振荡速度100r/min;

(5)取附有叶绿素的植物8-10.00g,于250mL的三角瓶内,将步骤(4)得到的发酵液0.1L倒入瓶内,用牛皮纸包扎瓶口;在振荡速度为100r/min摇床上振荡培养1天,植物上的叶绿素即被完全降解。

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