[发明专利]一种半乳糖苷化合物及其制备方法

权利要求书

1.一种半乳糖苷化合物β-6-半乳糖基-三氯蔗糖，化学名称为：1，6-二氯-1，6-二脱氧-β-D-呋喃果糖基-4-氯-4-脱氧-α-D-吡喃半乳糖基-β-D-吡喃半乳糖，其分子式为C₁₈H₂₉O₁₃C₁₃，化学结构式如下：

2.权利要求1所述半乳糖苷化合物β-6-半乳糖基-三氯蔗糖的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)分别用缓冲液配制浓度为0.6M的乳糖溶液、浓度为0.1M～0.6M的三氯蔗糖溶液和浓度为20～50U/mL的β-半乳糖苷酶溶液；

(2)将步骤(1)制得的乳糖溶液、三氯蔗糖溶液和β-半乳糖苷酶溶液按体积比9∶9∶2的比例混合，37～45℃水浴中反应2～10小时后，100℃煮沸10分钟终止反应，10000～12000转/分钟离心20分钟，将上清液用0.4μm滤膜过滤，取上清液，得滤液；

(3)将步骤(2)制得的滤液，经分离、干燥后，制得半乳糖苷化合物β-6-半乳糖基-三氯蔗糖。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的β-半乳糖苷酶溶液中的β-半乳糖苷酶选用专利ZL200510044897.9所述基因序列或GenBank登录号为CAI98003的基因序列按照专利ZL200510044897.9所述方法制得。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的缓冲液为浓度10～100mM，pH6～8的磷酸钾缓冲溶液。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的缓冲液为50mM，pH7.0的磷酸钾缓冲液。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的反应条件为45℃水浴反应10小时。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中的分离为用规格15mmID×100cm的Bio-gel P2色谱柱进行色谱分离，以水为流动相，收集洗脱样品，薄层层析检测，合并迁移距离相同的三氯蔗糖转糖基产物。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，上述色谱分离的样品上样量为1～2mL，洗脱流速为0.2～0.3mL/分钟；优选的所述步骤(3)中，样品上样量为1mL，洗脱流速为0.2mL/分钟。

9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，上述薄层层析检测步骤如下：取1μL洗脱液，薄层层析板点样，在展层剂中展开，雾喷显色剂后，于120℃烘烤5分钟使糖斑点显色。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，展层剂由正丁醇、无水乙醇和水按体积比5∶3∶2混合配制；显色剂是含有终浓度为20wt％的硫酸和终浓度为0.5wt％的3，5-二羟基甲苯的溶液。