[发明专利]一种亚单位疫苗免疫佐剂及应用

权利要求书

1.一种亚单位疫苗免疫佐剂，其特征是：该佐剂为抗菌肽与囊素三肽的融合肽，其氨基酸序列为SEQ.ID.NO.1，核苷酸序列为：SEQ ID NO.2。

2.根据权利要求1所述亚单位疫苗免疫佐剂，其特征是：所述的氨基酸序列SEQ.ID.NO.1是根据已在GeneBank中登录的猪抗菌肽Protegrin-1氨基酸序列和囊素三肽序列进行的设计，即采用氨基酸序列“GGGGS”将猪抗菌肽Protegrin-1与3拷贝囊素三肽进行串联，即为：“PG-1-GGGGS-3BS”，即为氨基酸序列SEQ.ID.NO. 1。

3.根据权利要求1所述亚单位疫苗免疫佐剂，其特征是：所述的核苷酸序列SEQ.ID.NO.2是以PG-1- GGGGS -3S的氨基酸序列为模板，参照毕赤酵母偏嗜密码设计的PG-1- GGGGS -3BS融合肽核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述亚单位疫苗免疫佐剂，其特征是：免疫佐剂基因是根据PG-1- GGGGS -3BS的核苷酸序列设计三条引物，用重叠拼接延伸 PCR（SOE-PCR）的方法扩增获得，三条引物核苷酸序列为：F1 SEQ.ID.NO.3，F2 SEQ.ID.NO.4，F3 SEQ.ID.NO.5。

5.根据权利要求4所述亚单位疫苗免疫佐剂，其特征是：所述的引物序列F1 SEQ.ID.NO.3具体序列为：AGAGGTGGTAGATTGTGTTATTGTAGAAGAAGATTCTGTG，引物序列F2 SEQ.ID.NO.4具体序列为：AACCACCACCACCTCTACCAACACAAACACAGAATCTTC，引物序列F3 SEQ.ID.NO.5具体序列为：GTGGTGGTTCTAAGCATGGTAAGCATGGTAAGCATGGT。

6.根据权利要求1所述亚单位疫苗免疫佐剂，其特征是：所述的氨基酸序列SEQ.ID.NO1.为： RGGRLCYCRRRFCVCVGRGGGGSKHGKHGKHG，核苷酸序列SEQ ID NO.2为：AGAGGTGGTAGATTGTGTTATTGTAGAAGAAGATTCTGTGTTTGTGTTGGTAGAGGTGGTGGTGGTTCTAAGCATGGTAAGCATGGTAAGCATGGT。

7.一种权利要求1所述亚单位疫苗免疫佐剂在制备禽类、猪亚单位疫苗中的应用，其特征在于：所述疫苗为禽或猪多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌外膜蛋白抗原亚单位疫苗。

8.根据权利要求7所述应用，其特征在于：应用方法是将PG-1- GGGGS -3BS免疫佐剂与亚单位疫苗等量混合，进行肌肉或腹膜内注射免疫，三周后按照同样方法第二次免疫。