[发明专利]人猴通用动脉粥样硬化检测引物组、检测芯片及检测方法

权利要求书

1.人猴通用动脉粥样硬化相关基因检测引物组，其特征在于：包括分别用于扩增动脉粥样硬化相关基因ACE、APOA1、APOC1、APOF、CCL2、CD40LG、DBP、EDN1、FAS、FASLG、FGG、GLG1、GRN、ICAM1、IL18、IL1β、IL1RN、IL6、IL6ST、IL8、ITGα2β、ITGα4、ITGα6、ITGαM、ITGαV、ITGβ1、ITGβ2、LTA、LTB、MTHFR、NFKβ1、OLR1、PLAUR、PLTP、PON2、SELL、SELP、SELPG、SERPINE1、TIMP1、TNF、TNFRSF1B的扩增引物对，上述基因扩增引物对序列分别为SEQ ID NO：1-84所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的人猴通用动脉粥样硬化相关基因检测引物组，其特征在于：还包括分别用于扩增GAPDH、RPL13A、YWHAZ基因的扩增引物对中的至少一对，扩增GAPDH、RPL13A、YWHAZ基因的扩增引物对序列分别为SEQ ID NO：85-90所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求1或2所述的人猴通用动脉粥样硬化相关基因检测引物组，其特征在于：还包括用于检测是否有DNA污染的扩增引物对，该扩增引物对序列为SEQ ID NO：91-92所示的核苷酸序列；还包括用于检测反转录效率的扩增引物对，该扩增引物对序列为SEQ ID NO：93-94所示的核苷酸序列；还包括用于检测PCR效率的扩增引物对，该扩增引物对序列为SEQ ID NO：95-96所示的核苷酸序列。

4.一种荧光定量PCR检测芯片，其特征在于，包括：权利要求1至3任一所述的人猴通用动脉粥样硬化相关基因检测引物组。

5.根据权利要求4所述的荧光定量PCR检测芯片，其特征在于：所述引物组中的各扩增引物对分别单独存在于96孔PCR板的孔中。

6.根据权利要求5所述的荧光定量PCR检测芯片，其特征在于：所述动脉粥样硬化相关基因的扩增引物对分别单独存在于96孔PCR板的2个孔中；用于扩增GAPDH、RPL13A、YWHAZ基因的扩增引物对分别单独存在于96孔PCR板的2个孔中；用于检测PCR效率的扩增引物对单独存在于96孔PCR板的2个孔中；用于检测反转录效率的扩增引物对单独存在于96孔PCR板的2个孔中；用于检测是否有DNA污染的扩增引物对单独存在于96孔PCR板的2个孔中。

7.一种利用权利要求1至3任一所述的人猴通用动脉粥样硬化相关基因检测引物组进行动脉粥样硬化相关基因表达情况检测的方法。

8.根据权利要求7所述的动脉粥样硬化相关基因表达情况检测的方法，其特征在于：所述引物组中的各扩增引物对分别在96孔PCR板的各个孔中进行单重荧光定量PCR反应。

9.根据权利要求8所述的动脉粥样硬化相关基因表达情况检测的方法，其特征在于：所述检测方法中还设有管家基因对照，所述管家基因为GAPDH、RPL13A、YWHAZ，该管家基因对照为上述管家基因中的至少一个；还设有分别用于检测PCR效率、用于检测反转录效率和用于检测是否有DNA污染的对照。

10.根据权利要求9所述的动脉粥样硬化相关基因表达情况检测的方法，其特征在于：所述荧光定量PCR反应的条件为：（1）95℃变性30s；（2）95℃变性5s；60℃退火延伸34s，重复40个循环；（3）熔解曲线分析，95℃，15s；60℃，1min；按0.3℃/s的升温速度升到95℃，然后95℃，15s。