[发明专利]一种HBV基因分型的PCR检测方法有效
| 申请号： | 201110024107.6 | 申请日： | 2011-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN102140537A | 公开（公告）日： | 2011-08-03 |
| 发明（设计）人： | 欧启水;商红艳;程祖建 | 申请（专利权）人： | 福建医科大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350005 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 hbv 基因 pcr 检测 方法 | ||
1.一种HBV基因分型的PCR检测方法，其特征在于：所述方法的步骤为：根据乙型肝炎病毒基因型的全基因组序列设计引物；在上述引物的存在下，在荧光PCR仪中，对从血清样品提取的DNA进行PCR扩增，利用熔解曲线分析PCR产物，根据PCR产物的Tm值来判断基因型，实现乙型肝炎病毒的基因分型。
2.根据权利要求1所述的HBV基因分型的PCR检测方法，其特征在于：所述乙型肝炎病毒基因型为乙型肝炎病毒基因型B，引物序列如下：
上游引物BF：AGTTAATCATTACTTCCAGACGC
下游引物BR：CTGTAGATCTTGTTCCCAAGAAT。
3.根据权利要求1所述的HBV基因分型的PCR检测方法，其特征在于：所述乙型肝炎病毒基因型为乙型肝炎病毒基因型C，引物序列如下：
上游引物CF：TGTTCCGACTACTGCCTCAC
下游引物CR：GGACAAATTGGAGGACAAGAG。
4.根据权利要求1所述的HBV基因分型的PCR检测方法，其特征在于：所述PCR扩增的条件为：采用50μL的反应体系，2倍浓缩的SYBR Premix Ex Taq 25μL，引物对10μM/L各1μL，50倍浓缩的ROX Reference Dye 1μL，HBV DNA模板4μL，dH2O 16μL；于ABI7000荧光PCR仪进行反应并检测，PCR反应条件：95℃ 30s，然后按95℃ 5s，60℃ 31s，进行40个循环，荧光检测在60℃。
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