[发明专利]用于诱变检测的测定法

权利要求书

1.一种构建体，包含被生色酶基因破坏的营养缺陷型基因，所述生色酶基因被编码选择标记的多核苷酸破坏。

2.权利要求1所述的构建体，其中所述营养缺陷型基因包括His3基因且所述选择标记包括Ura3基因。

3.权利要求1所述的构建体，其中所述构建体包括质粒。

4.权利要求1所述的构建体，其中所述构建体是被引入至宿主细胞基因组中的重组体。

5.权利要求1所述的构建体，其中所述生色酶基因包括LacZ。

6.权利要求4所述的构建体，其中所述宿主细胞包括真核细胞。

7.权利要求6所述的构建体，其中所述宿主细胞选自由哺乳动物淋巴样细胞；人类类淋巴母细胞；和酵母细胞组成的群组。

8.权利要求7所述的构建体，其中所述酵母细胞包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。

9.权利要求1所述的构建体，其包含选自由下列各项组成的群组的序列：

(a)SEQ ID NO：1，

(b)与SEQ ID NO：195％相同的序列；

(c)(a)或(b)的互补体；和

(d)(a)、(b)或(c)的序列，其中T可以是U。

10.一种宿主细胞，其被重组改造为包含权利要求1所述的构建体。

11.权利要求10所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是真核细胞。

12.权利要求11所述的宿主细胞，其中所述细胞是酿酒酵母。

13.一种表征试剂的诱变性的方法，包括使权利要求10所述的宿主细胞与所述试剂接触，并测量β-半乳糖苷酶的活性。

14.一种表征试剂的方法，包括：

用或不用试剂处理包含DEL选择标记的真核细胞培养物；

在合适的选择培养基的存在下测量所述细胞培养物的被处理部分的线粒体活性；以及

在所述选择培养基的存在下测量所述细胞培养物的未处理部分的线粒体活性。

15.权利要求14所述的方法，其中线粒体活性相对于对照的增加指示该测试试剂促进诱变。

16.权利要求14所述的方法，其中所述线粒体活性通过检测MTT或MTS的减少来测量。

17.权利要求14所述的方法，其中所述细胞培养物包含选自由哺乳动物淋巴样细胞；人类类淋巴母细胞；和酵母细胞组成的群组的细胞。

18.权利要求17所述的方法，其中所述细胞培养物包含酿酒酵母。

19.权利要求14所述的方法，其中所述检测通过检测比色沉淀物来测量。

20.权利要求14所述的方法，其中所述方法在多孔板中进行。

21.权利要求14所述的方法，其中所述DEL选择标记是代谢酶或途径。

22.权利要求14所述的方法，其中所述DEL选择标记是抗-微生物抗性基因。

23.权利要求14所述的方法，其中所述DEL选择标记是his基因。