[发明专利]疾病治疗用试剂

权利要求书

1.一种筛选能与CD4结合的分子的方法，所述方法包括：

(a)提供一种或多于一种候选分子；

(b)确定所述一种或多于一种候选分子是否能与人CD4的一个或多于一个以下区域结合：氨基酸148～154、氨基酸164～168和氨基酸185～192；和

(c)将步骤(b)所确定的分子选定为能与CD4结合。

2.如权利要求1所述的方法，其中，步骤(b)还包括确定所述一种或多于一种候选分子是否能与人CD4的至少一个以下氨基酸结合：26、156、159和161。

3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中，步骤(b)包括确定所述一种或多于一种候选分子是否能在没有盐桥的情况下与CD4结合。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述一种或多于一种候选分子是抗体、源自抗体的分子、肽、寡核苷酸、siRNA、模拟表位、肽模拟物、折叠体、小分子、基于天然或工程化脂质运载蛋白的识别蛋白、DARPin、纤连蛋白、Affibody、Kunitz型抑制剂、肽适体、核酶或毒素。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述抗体是人源化抗体或骆驼抗体。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述一种或多于一种候选分子是抗体或抗体片段，所述抗体或抗体片段包含BT061轻链的CDR1和CDR2以及BT061重链的CDR1和CDR3，并且在所述CDR序列中可选地具有氨基酸取代，条件是：

(i)轻链CDR1包含：Ser32；Gly33；和Tyr34；

(ii)轻链CDR2包含：Leu54和Ile57；

(iii)重链CDR1包含：Asp31、Glu31、Thr31、Cys31、Pro31、Met31或Tyr31；和

(iv)重链CDR3包含：Tyr103、Phe103或His103；Arg104；Tyr105；Asp106；和Trp110、Phe110、His 110或Tyr110。

7.如权利要求6所述的方法，其中，BT061轻链的CDR1和CDR2以及BT061重链的CDR1和CDR3的序列中的所述氨基酸取代选自表4和表5中所列的那些氨基酸取代。

8.如权利要求6或权利要求7所述的方法，其中，所述抗体或抗体片段包含含有Tyr53或Phe53的轻链和含有Ser28的重链。

9.如权利要求6～8中任一项所述的方法，其中，所述抗体或抗体片段包含含有Asp64的轻链和/或含有Glu 56的重链。

10.如权利要求6～9中任一项所述的方法，其中，所述抗体或抗体片段还包含BT061轻链的CDR3和/或BT061重链的CDR2，并且在这些CDR的序列中可选地具有氨基酸取代，其中所述取代选自表4和表5中所列的那些氨基酸取代。

11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，步骤(a)～(c)在计算机系统上进行。

12.如权利要求11所述的方法，所述方法还包括步骤(d)：制备步骤(c)中所选定的分子。

13.如权利要求12所述的方法，所述方法还包括步骤(e)：使步骤(d)中制备的分子在体外与CD4+细胞接触或与包含人CD4的一个或多于一个以下区域的肽或多肽接触：氨基酸148～154、氨基酸164～168和氨基酸185～192。

14.如权利要求13所述的方法，其中，步骤(e)包括确定步骤(d)中制备的分子是否：

(i)与包含人CD4的一个或多于一个以下区域的肽结合：氨基酸148～154、氨基酸164～168和氨基酸185～192；

(ii)活化CD4+CD25+调节T细胞；和/或

(iii)减少CD4表达细胞上的CD4受体表达。

15.如权利要求1～10中任一项所述的方法，其中，步骤(a)～(c)在体外进行，并且步骤(b)包括使所述一种或多于一种候选分子与包含人CD4的一个或多于一个以下区域的肽或多肽接触：氨基酸148～154、氨基酸164～168和氨基酸185～192。

16.如权利要求15所述的方法，其中，所述一种或多于一种候选分子是分子库。