[发明专利]增加植物中多肽表达的翻译增强子元件堆叠

权利要求书

1.多核苷酸构建体，其包含：(a)至少一种源自病毒的翻译增强子元件，其与至少一种源自细胞基因的翻译增强子元件串联堆叠，以及(b)有效连接的编码目的多肽的多核苷酸。

2.权利要求1的多核苷酸构建体，其中所述病毒是植物病毒。

3.权利要求2的多核苷酸构建体，其中所述病毒是RNA病毒。

4.权利要求3的多核苷酸构建体，其中所述病毒为组IV(+)ssRNA病毒的成员，并且其中源自所述病毒的所述翻译增强子元件包含所述病毒的前导肽序列（5'UTR）。

5.权利要求4的多核苷酸构建体，其中所述病毒为烟草花叶病毒（Tobamovirus）属的成员，或者选自马铃薯Y病毒科（Potyviridae）、雀麦花叶病毒科（Bromoviridae）和蕃茄丛矮病毒科（Tombusviridae）的科的成员。

6.权利要求5的多核苷酸构建体，其中所述病毒选自烟草花叶病毒（TMV）、烟草蚀纹病毒（TEV）、苜蓿花叶病毒（AMV）和玉米坏死线条病毒（MNeSV）。

7.权利要求6的多核苷酸构建体，其中所述病毒为TMV，并且其中源自所述TMV的所述翻译增强子元件包含SEQ ID NO:1中所示的前导肽序列或者其功能性片段或变体，其中所述变体与SEQ ID NO:1中所示的序列具有至少95%的序列同一性。

8.权利要求6的多核苷酸构建体，其中所述病毒为TEV，并且其中源自所述TEV的所述翻译增强子元件包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:18中所示的前导肽序列或者其功能性片段或变体，其中所述变体与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:18中所示的序列具有至少95%的序列同一性。

9.权利要求6的多核苷酸构建体，其中所述病毒为AMV或MNeSV，并且其中源自所述AMV或所述MNeSV的所述翻译增强子元件包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:19中所示的前导肽序列或者其功能性片段或变体，其中所述变体与SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:19中所示的序列具有至少95%的序列同一性。

10.权利要求1的多核苷酸构建体，其中所述源自细胞基因的翻译增强子元件为醇脱氢酶基因。

11.权利要求10的多核苷酸构建体，其中所述醇脱氢酶基因来自单子叶植物或双子叶植物。

12.权利要求10的多核苷酸构建体，其中所述醇脱氢酶基因来自烟草、水稻、拟南芥、大豆或玉米。

13.权利要求10的多核苷酸构建体，其中源自所述细胞基因的所述翻译增强子元件包含SEQ ID NO:4中所示的烟草醇脱氢酶前导肽序列或者其功能性片段或变体，其中所述变体与SEQ ID NO:4中所示的序列具有至少95%的序列同一性。

14.权利要求10的多核苷酸构建体，其中源自所述细胞基因的所述翻译增强子元件包含SEQ ID NO:7中所示的玉米醇脱氢酶前导肽序列或者其功能性片段或变体，其中所述变体与SEQ ID NO:7中所示的序列具有至少95%的序列同一性。

15.包含权利要求13的多核苷酸构建体的表达盒。

16.包含权利要求14的多核苷酸构建体的表达盒。

17.权利要求15的表达盒，其中所述多核苷酸构建体有效连接至在植物细胞中具有功能的启动子，并且其中所述启动子选自组成型启动子、诱导型启动子和组织特异性启动子。

18.权利要求16的表达盒，其中所述多核苷酸构建体有效连接至在植物细胞中具有功能的启动子，并且其中所述启动子选自组成型启动子、诱导型启动子和组织特异性启动子。

19.包含权利要求1的多核苷酸构建体的植物。

20.包含权利要求17的多核苷酸构建体的植物。

21.包含权利要求18的多核苷酸构建体的植物。

22.权利要求19的植物，其中所述多核苷酸构建体或所述表达盒稳定地整合到该植物的基因组中，并且其中所述多核苷酸构建体有效连接至在植物细胞中具有功能的启动子。