[发明专利]活化诱导胞苷脱氨酶(AID)突变体及使用方法

权利要求书

1.一种分离或纯化的核酸分子，其包含编码功能性突变活化诱导胞苷脱氨酶(AID)蛋白的核苷酸序列，所述功能性突变活化诱导胞苷脱氨酶(AID)蛋白的氨基酸序列与人AID蛋白的氨基酸序列(SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2)的不同之处在于在选自残基34、残基82和残基156的残基处的至少一个氨基酸取代，其中所述功能性突变AID蛋白在细菌乳突形成测定中与所述人AID蛋白相比活性提高至少10倍。

2.如权利要求1所述的分离或纯化的核酸分子，其中在残基34处的氨基酸是被取代的。

3.如权利要求2所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基34处的氨基酸取代为脂肪族氨基酸取代。

4.如权利要求3所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基34处的脂肪族氨基酸取代为K34E或K34D。

5.如权利要求1-4中任一项所述的分离或纯化的核酸分子，其中在残基82处的氨基酸是被取代的。

6.如权利要求5所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基82处的氨基酸取代为脂肪族氨基酸取代。

7.如权利要求6所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基82处的脂肪族氨基酸取代为T82I或T82L。

8.如权利要求1-7中任一项所述的分离或纯化的核酸分子，其中在残基156处的氨基酸是被取代的。

9.如权利要求8所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基156处的氨基酸取代为脂肪族氨基酸取代。

10.如权利要求9所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基156处的脂肪族氨基酸取代为E156G或E156A。

11.如权利要求8-10中任一项所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变活化诱导胞苷脱氨酶(AID)蛋白还包含在选自残基34、82和157的残基处的至少一个氨基酸取代。

12.如权利要求8-11中任一项所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变活化诱导胞苷脱氨酶(AID)蛋白还包含在残基34和157处的氨基酸取代。

13.如权利要求11或权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述在残基34、82和157处的氨基酸取代为脂肪族氨基酸取代。

14.如权利要求11-13中任一项所述的分离或纯化的核酸分子，其中

(a)所述在残基34处的氨基酸取代为谷氨酸(E)或天冬氨酸(D)，

(b)所述在残基82处的氨基酸取代为异亮氨酸(I)或亮氨酸(L)，和

(c)所述在残基157处的氨基酸取代为苏氨酸(T)或赖氨酸(K)。

15.如权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在选自残基9、38和180的残基处的至少一个氨基酸取代。

16.如权利要求12或权利要求15所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在残基9、38和180处的氨基酸取代。

17.如权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在选自残基42、115、132、183和198的残基处的至少一个氨基酸取代。

18.如权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在残基42、115、132、183和198处的氨基酸取代。

19.如权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在选自残基9、96和181的残基处的至少一个氨基酸取代。

20.如权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在残基9、96和181处的氨基酸取代。

21.如权利要求12所述的分离或纯化的核酸分子，其中所述功能性突变AID蛋白还包含在残基13和/或残基197处的至少一个氨基酸取代。