[发明专利]针对肌钙蛋白I的抗体及其使用方法

说明书

发明背景

发明领域

本发明涉及针对肌钙蛋白I的抗体及其使用方法。

背景信息

肌钙蛋白I是可以在例如心肌梗死之后或过程中的心肌损伤测定中使用的肌肉蛋白质。特别地，肌钙蛋白I是肌钙蛋白复合物的3个亚单位之一，其定位于肌肉收缩器的细丝上。这种复合物在控制肌肉收缩的过程中具有主要作用。其他2个亚单位(即，T和C)在心脏以及骨骼肌组织中也由肌钙蛋白I固定在细肌丝上。

测量人血清中的心脏肌钙蛋白I的测定已得到描述。例如，放射性测定已用于这个目的(Cummins等人，Am Heart Journal 113：1333-1344(1987)。然而，该测定利用与骨骼形式的肌钙蛋白I具有显著交叉反应性的多克隆抗体。进一步地，已利用了使用2种不同单克隆抗体的夹心测定(Bodar等人，Clinical Chemistry 38：2203-2214(1992)；还参见美国专利号7,285,418)。不幸的是，此种测定具有非常高的不精确性。因此，当然存在关于对于肌钙蛋白I高度特异性且灵敏的免疫测定的需要。这些免疫测定还必须利用对骨骼组织中发现的肌钙蛋白I不具有交叉反应性的抗体。特别地，需要此种免疫测定，从而使得合适疗法可以由治疗医生利用，从而对受累患者给予最佳的可能预后。

本文提及的所有专利和出版物在此整体引入作为参考。

发明概述

本发明涉及能够与心脏肌钙蛋白I结合的结合蛋白，特别是抗体。特别地，这些抗体与肌钙蛋白I的一个或多个表位结合。进一步地，本发明还提供了产生且例如在诊断测定中使用这些结合蛋白或其部分的方法。特别地，本发明包含中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，称为TnI 19C7AM1 hG1 CHO 204，由美国典型培养物保藏中心(ATCC)指定保藏号PTA-9816，以及由这种细胞系产生的重组抗体。

另外，本发明包括与肌钙蛋白I结合的包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，所述抗原结合结构域包括包含选自下述的氨基酸序列的至少一个互补性决定区(CDR)：GYTFTDYNLH(SEQ ID NO：52)、YIYPYNGITGYNQKFKS(SEQ ID NO：53)、DAYDYDLTD(SEQ ID NO：54)、RTSKNVGTNIH(SEQ ID NO：55)、YASERLP(SEQ ID NO：56)和QQSNNWPYT(SEQ ID NO：57)。本发明的结合蛋白可以包括例如这些CDRs中的至少3个。进一步地，这种结合蛋白还可以包括人接纳体构架或支架。这种结合蛋白可以选自例如免疫球蛋白分子、单克隆抗体、嵌合抗体、CDR嫁接的抗体、人源化抗体、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv、二硫键连接的Fv、scFv、单结构域抗体、双抗体、多特异性抗体、双重特异性抗体、抗独特型抗体、双特异性抗体或这些实体中的任何一种的功能上活性的表位结合片段。

本发明还包含编码结合蛋白的分离的核酸分子，其中所述结合蛋白的可变重链的氨基酸序列与SEQ ID NO.：25具有至少70％同一性(参见图12)。这种分子还可以包括与SEQ ID NO.：28具有至少70％同一性的可变轻链(参见图12)。

此外，本发明包括编码结合蛋白的分离的核酸分子，其中所述结合蛋白的可变重链的氨基酸序列是SEQ ID NO.：25。

另外，本发明包括编码结合蛋白的分离的核酸分子，其中所述结合蛋白的可变轻链的氨基酸序列是SEQ ID NO.：28。这种分子可以进一步包括编码可变重链的分离的核酸分子，其中所述重链的氨基酸序列是SEQ ID NO.：25。

本发明还包括包含与调节元件(例如启动子)附着的上述一种或多种核酸分子的载体，以及包括这种载体的宿主细胞。

此外，本发明包括产生能够与肌钙蛋白I结合的上述任何一种结合蛋白的方法，所述方法包括在足以产生目的结合蛋白的时间和条件下培养上述宿主细胞。本发明还包括通过这种方法产生的结合蛋白。

此外，本发明包括包含上述任何一种或多种结合蛋白和药学上可接受的载体的药物组合物。