[发明专利]人源化抗CD20抗体及使用方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请要求分别在2009年2月16日和2009年2月18日提交的美国临时申请第61/152,778号和第61/153,499号的权益；这些申请的全部内容在此通过引用并入本文。

通过计算机可读CD提交的序列表的参考

本申请通过快递邮件提交，并且包括计算机可读CD上.txt格式的序列表。该.txt文件包含2010年2月15日创建的名称为″13790-90.txt″的序列表，大小为92,065字节。该.txt文件文件中含有的序列表是说明书的一部分并在此通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及人源化抗CD20抗体及其在治疗各种疾病和病症中的用途。本发明还涉及编码此类抗体的核酸、制备此类抗体的方法和包含此类抗体的组合物。

背景技术

人CD20(也称为人B淋巴细胞限制分化抗原以及Bp35)是位于前B淋巴细胞和成熟B淋巴细胞上的分子量约35千道尔顿的疏水性跨膜蛋白。造血干细胞、祖B细胞、正常浆细胞或其他正常组织上未发现CD20。

人CD20是免疫治疗B细胞瘤的良好靶标，因为它在超过90％的恶性B细胞表面表达，而不在造血干细胞、正常浆细胞、骨髓、T谱系、内皮或其他非淋巴样细胞上表达。人CD20还是免疫治疗自身免疫疾病的良好靶标，因为已经显示B细胞清除是治疗自身免疫疾病的有效策略。例如，作为嵌合抗CD20抗体C2B8的利妥昔单抗(作为RITUXAN可商业途径获得，由Biogen Idec Inc.和Genentech，Inc.销售)被批准用于各种适应症，包括非霍奇金淋巴瘤和类风湿性关节炎。

结合抗体时，CD20不显著改变，也不脱落。已经显示抗CD20抗体具有许多抗体效应功能，包括通过单核效应细胞的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)、补体依赖性溶胞作用、启动胞间信号例如钙流、抑制细胞生长、和诱导细胞分化。还已经显示抗CD20抗体诱导恶性B细胞系的凋亡，特别是在密集交联之后，例如通过表达IgG的Fc结构域受体(FcγR)的细胞。

抗CD20单克隆抗体利妥昔单抗、抗B1和1F5对B细胞系具有类似的凋亡作用。

目前鼠抗体和嵌合抗体的限制包括人抗鼠抗体(HAMA)应答和人抗嵌合抗体(HACA)应答。

发明概述

一方面，提供了人源化抗体，包括：

(a)包括轻链可变区的轻链，所述轻链可变区包括选自由以下组成的组的氨基酸序列：

(1)Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly AspArg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Leu Ser Phe Met His Trp Tyr GlnGln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Xaa₄₅ Xaa₄₆ Ile Tyr Ala Thr Ser Asn Leu AlaSer Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Xaa₇₀ Thr LeuThr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Xaa₈₆ Cys His Gln TrpSer Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys(SEQ ID NO：1)

其中

Xaa₄₅是Pro或Leu；

Xaa₄₆是Trp或Leu；

Xaa₇₀是Tyr或Phe；并且

Xaa₈₆是Tyr或Phe；和