[发明专利]一种萎缩芽孢杆菌及其制剂和应用

权利要求书

1.一种萎缩芽孢杆菌菌株Aj080319IA-12，其特征在于，所述菌株分离于野生刺参肠道，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M2010316。

2.一种饲料添加剂，其特征在于，包括：萎缩芽孢杆菌菌株Aj080319IA-12，所述菌株分离于野生刺参肠道，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2010316。

3.根据权利要求2所述饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：

A.平板培养复壮：将低温保存的萎缩芽孢杆菌菌株Aj080319IA-12接种于TSB固体平板培养基上，于20～35℃培养12～36h，使菌种复壮并形成单菌落；然后挑取单菌落接种于TSB斜面培养基上，于20～35℃培养12～36h；

B.种子液的制备：将步骤A培养的菌种用5～30‰灭菌的生理盐水制成1×10⁵CFU/mL的菌悬液，以2～10％的接种量接种于TSB液体培养基中，20～35℃，100～200rpm振荡培养18～20h，获得种子液；

C.发酵培养：将步骤B中的种子液以2～10％的接种量接种于发酵培养基中，20～35℃，100～200rpm振荡培养50～150h，至活菌数为0.2～8×10⁹CFU/mL，中止发酵；

所述的发酵培养基的组分及其重量百分比分别为：葡萄糖1～5％，大豆粉饼1～5％，氯化钠1～3％，其余为水；

D.微生物制剂的制备：向步骤C的发酵液中加入沸石粉，每100mL发酵液中加入5～30g沸石粉，100～200rpm振荡20～60min后静止20～60min，将上述发酵液于4℃6000rpm离心20min，弃上清，每100g沉淀中加入20～40g沸石粉混匀后，于30～60℃烘干2～5h。

4.根据权利要求2或3所述的饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂为用于海参的饲料添加剂，添加剂量为海参饲料总重量的0.5～7‰。

5.根据权利要求2～4中任一项所述的饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂为固态粉状制剂。

6.一种微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂的制备方法包括以下步骤：

A.平板培养复壮：将低温保存的菌株接种于TSB固体平板培养基上，于22～33℃培养14～38h，使菌种复壮并形成单菌落；然后挑取单菌落接种于TSB斜面培养基上，于22～33℃培养14～36h；

B.种子液的制备：将步骤A培养的菌种用5～30‰灭菌的生理盐水制成1×10⁵CFU/mL的菌悬液，以3～10％的接种量接种于TSB液体培养基中，20～35℃，100～200rpm振荡培养18～22h，获得种子液；

C.发酵培养：将步骤B中的种子液以3～10％的接种量接种于发酵培养基中，23～35℃，100～200rpm振荡培养60～150h，至活菌数为0.2～8×10⁹CFU/mL，中止发酵；

所述的发酵培养基的组分及其重量百分比分别为：葡萄糖1～5％，大豆粉饼1～5％，氯化钠1～3％，其余为水；

D.微生物制剂的制备：向步骤C的发酵液中加入沸石粉，每100mL发酵液中加入6～30g沸石粉，100～200rpm振荡20～60min后静止20～60min，将上述发酵液于4℃6000rpm离心20min，弃上清，每100g沉淀中加入20～40g沸石粉混匀后，于30～60℃烘干2～5h。