[发明专利]一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物提取方法，特别是涉及一种柳叶水甘草碱的提取方法。 

背景技术

柳叶水甘草碱（Tabersonine，CAS NO.4429-63-4 ）是从夹竹桃植物柳叶水甘草叶、长春花种子、椭圆叶水甘草种子或者非洲加纳沃坎加树种子马铃果中提取的，其化学名称为Aspidospernidine-3-carboxylic acid,2,3,6,7-tetradehydro-(5α, 12β,19α)-methylseter，分子式为C₂₁H₂₄N₂O₂，分子量为336.42。柳叶水甘草碱目前主要用于合成一种抗癌药物：长春西汀；同时经动物毒理实验验证，柳叶水甘草碱具有明显的降血压作用。 

美国专利US3758478，公开了一种从非洲马铃果种提取柳叶水甘草碱的工艺，包括多次溶剂提取、萃取、结晶等步骤，该方案存在的问题是：步骤繁琐、需要使用大量的有苯、氯仿等有毒溶剂，且提取率低。申请号为200810017789.6的中国发明专利申请，张小燕等公开了一种柳叶水甘草碱的制备工艺，主要包括原料预处理、加热回流处理、酸化、上柱纯化、碱化、萃取、然后用水洗正烷层，除溶剂得产物等步骤。该工艺具有化学步骤简单、生产周期短等优点，但是该工艺也存在以下缺点：1）采用正已烷或石油醚提取，安全性较差、提取效率偏低，提取时间长；2）提取液中含有的可溶性大分子杂质含量高，直接上柱纯化，纯化效果差，且树脂使用时间短，再生频繁。 

发明内容

针对现有技术中柳叶水甘草碱提取方法，提取率低、提取时间长，纯化效果差等缺点，本发明的目的是提供一种工艺简单、生产成本低、产品纯度高的从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法。 

为达到上述目的，本发明提供的技术方案为，一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法，包括如下步骤： 

1)        预处理：将马铃果粉碎后，备用；

2)        超声波提取：采用5-8倍马铃果粉末体积、质量比为80%-99.5%的乙醇溶液，在超声波作用下，进行提取2次，合并提取液，过滤提取液，得滤液；

3)        浓缩酸化：减压浓缩滤液，回收乙醇，浓缩液采用5-6倍体积、PH值为4-5的酸水溶液溶解，酸水液备用；

4)        超滤过滤：酸水液进行超滤过滤，除去可溶性大分子杂质，得到超滤透析液；

5)        上柱纯化：超滤透析液过大孔树脂吸附，用水洗杂，再用质量比为70%-80%的乙醇水溶液洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；

6)        碱化、萃取：调节洗脱浓缩液的浓度，用浓氨水调节PH值至10-11，采用正己烷数次萃取，溶液用水洗涤正己烷层，回收正己烷，得到目标产物柳叶水甘草碱。

步骤2）中所述的超声波提取，采用超声波功率为200-250瓦，工作时间20-40分钟，工作温度为50-60℃，工作方式为工作5秒，间歇5秒。 

步骤4）中所述的超滤过滤，采用的超滤膜的特征为截留分子量为3000-8000道尔顿，优选5000道尔顿，超滤膜的材质为聚砜、聚醚砜、复合超滤膜，其工作条件为温度25～35℃，工作压力0.5～2.5 Mpa。 

步骤5）中所述的大孔树脂优选HPD-100大孔吸附树脂，HPD-100大孔吸附树脂属于非极性树脂，由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称芳香族吸附树脂，市面上即可购得。HPD-100大孔吸附树脂适用范围比较广谱，适用于皂苷类、黄酮类、萜类等天然产物及中草药植物的提取分离。 

本发明的优点是： 

1)      步骤1中采用超声波提取，具有提取温度低、提取率高、提取时间短等优点，可以提高柳叶水甘草碱的提取率和缩短提取时间；

2)      步骤1中采用乙醇提取，安全可靠；

3)      步骤4中酸水液采用超滤过滤，可以有效除去溶液中的可溶性大分子杂质，如色素等，减轻了后续的大孔树脂吸附负担，提高了目标产物的吸附率，以及产品纯度，特别是在超滤膜截留分子量为5000道尔顿时，具有纯化效果好，杂质去除率高，目标产物损失小、过滤速度快等优点；

4)      步骤4采用HPD100大孔吸附树脂吸附，对目标产物柳叶水甘草碱的吸附效果好、且树脂寿命长、再生容易。

具体实施方式

下面结合具体实施例对发明做进一步说明。 

实施例1