[发明专利]构建应用于高质量噬菌体抗体库的表达载体

权利要求书

1.一种载体，按照如下方法制备：

1)将SacB的编码基因1插入到pDF的多克隆位点间，得到中间载体PSBX；

2)将步骤1)得到的中间载体PSBX的BssHII酶切位点改为BglII酶切位点，得到中间载体PSGX；

3)将SacB的编码基因2插入到步骤2)得到的中间载体PSGX的Nhe I和NcoI酶切位点间，得到载体pDF-D-SacB；

所述SacB的编码基因1为序列表的序列1自5’末端第30-1908位核苷酸；

所述SacB的编码基因2为序列表中的序列2自5’末端第7-1857位核苷酸。

2.根据权利要求1所述的载体，其特征在于：

步骤1)中，所述将SacB的编码基因1插入到pDF的多克隆位点为将SacB的编码基因1插入到pDF的BssHII和XbaI酶切位点间。

3.一种载体，按照如下方法制备：

1)以puc19-SacB为模板，用引物对1进行PCR扩增，得到PCR产物1，将PCR产物1插入到pDF的BssHII和Xba I酶切位点间，得到中间载体PSBX；所述PCR产物1即为SacB的编码基因1，所述SacB的编码基因1为序列表的序列1自5’末端第30-1908位核苷酸；

所述引物对1中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列5，所述引物对1中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列6；

2)将步骤1)得到的中间载体PSBX上的BssHII酶切位点改变为BglII酶切位点，得到中间载体PSGX；

3)以pUC19-SacB为模板，用引物对2进行PCR扩增，得到PCR产物2，将得到的PCR产物2插入到步骤2)得到的中间载体PSGX的Nhe I和Nco I位点间，得到重组载体pDF-D-SacB；所述PCR产物2即为SacB的编码基因2，所述SacB的编码基因2为序列表中的序列2自5’末端第7-1857位核苷酸；

所述引物对2中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列7，所述引物对2中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列8。

4.含有权利要求1-3中任一所述的载体的转基因细胞系或重组菌或重组病毒。

5.权利要求1-3中任一所述的载体在制备噬菌体抗体库中的应用；

或权利要求4所述转基因细胞系或重组菌或重组病毒在制备噬菌体抗体库中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：

所述应用中，所述抗体为抗乙肝表面抗原抗体。