[发明专利]药物中游离肼的检测方法

说明书

发明领域

本发明涉及药物中杂质分析检测技术领域，具体地说是氨氯地平类药物中所含游离肼的检测方法。

发明背景

二氢吡啶类的钙离子拮抗剂为当前一线的降压药物，最早应用的品种是硝苯地平。现在有不少新的品种，例如尼群地平，尼卡地平，氨氯地平，拉西地平等。其除降压作用外还能治疗心绞痛，应用广泛。

其中氨氯地平属双氢吡啶类中的长效品种，每天早餐后服一次，即能控制一天24小时的血压，服用方便，降压平稳，血压波动小，不良反应也少。伴有心力衰竭者也可应用，不受影响。目前在我国已上市的氨氯地平有苯磺酸氨氯地平、马来酸氨氯地平、甲磺酸氨氯地平与苯磺酸左旋氨氯地平、L-门冬氨酸氨氯地平等五种。氨氯地平类药物因治疗范围广，药效时间长，不良反应少，治疗效果好受到广大高血压患者的青睐，在高血压治疗药物中占据很高的市场份额。

当前氨氯地平类药物合成途径中，普遍应用的是氨氯地平亚胺与水合肼反应，生成氨氯地平，见以下反应式。后添加各种基团，生成氨氯地平类药物。此途径步骤简单，工艺易实施，收率高，是目前常用的氨氯地平药物合成途径。但因其合成工艺中引入水合肼，肼是一种诱变剂和致癌物质，因此要对氨氯地平药物中的肼进行方法学研究和控制。

氨氯地平亚胺    水合肼    氨氯地平

中华人民共和国卫生部药典委员会，卫生部药品标准(化学药品及制剂第一册)，1989年1月，描述用比浊法对药物中游离肼进行检测，但该方法专属性差，准确度低，人为误差大，放置时间过长会对结果造成较大影响。

中华人名共和国药典二部(2010版)中描述异烟肼原料和注射用异烟肼中游离肼的检查均采用薄层色谱法，最大限度定为0.02％。但该方法准确度和精密度差，灵敏度低，人为误差大。

王洁，差示分光光度法应用于异烟肼注射液中游离肼的测定，现代食品与药品杂质，2007年第17卷第5期中描述了采用差示分光光度法，以对二甲氨基苯甲醛为显色剂，在参比溶液中加入3％丙酮消除干扰，在456nm检测波长处，用紫外分光光度计测定游离肼的方法。该试验采用多种溶剂，操作比较复杂。

发明内容

本发明采用分光光度计法测定氨氯地平类药物中游离肼含量。原理为：游离肼+对二甲氨基苯甲醛→黄色缩合物于456nm波长处有最大吸收，

不含游离肼的氨氯地平对照品+对二甲氨基苯甲醛→缩合物于456nm波长处无吸收。

本方法相比于已有的游离肼检测方法，准确度好，灵敏度高，误差小，且操作简便，易于实施。

测定方法：

对二甲氨基苯甲醛试液：取对二甲氨基苯甲醛适量，加盐酸使溶解，用水稀释至适宜浓度，即得

对照品溶液制备精密称取含游离肼化合物适量，制成肼标准液。

供试品溶液制备称取氨氯地平类药物样品适量，加水溶解制成适宜浓度的供试品溶液。

测定：精密吸取对照品溶液、供试品溶液适量，置量瓶中，加对二甲氨基苯甲醛试液适量，再加水稀释至刻度，摇匀，反应2-5分钟在456nm波长处测定吸光度，以含相应浓度的对二甲氨基苯甲醛试液的水溶液为空白。

公式：A对照品＝EC对照品L    ①

A供试品＝EC供试品L          ②

根据公式①、②得出C供试品＝A供试品＊C对照品/A对照品

肼含量％＝供试品溶液浓度＊供试品溶液体积/供试品称样量＊100％由此可计算出氨氯地平药物中游离肼含量。

实施例

实施例1：用分光光度法测定烟酸氨氯地平中游离肼的含量。

仪器：岛津UV1800紫外分光光度计

试剂：硫酸肼  分析纯    北京金龙化学试剂有限公司

对二甲氨基苯甲醛试液：取对二甲氨基苯甲醛20g，加盐酸172.5ml使溶解，用水稀释至1000ml，即得。

溶液制备

对照品溶液制备精密称取硫酸肼40.6mg(相当于肼10mg)，加水溶解并稀释至100ml；精密量取1ml，用水稀释至100ml，制成1μg/ml的肼标准液。

供试品溶液制备取烟酸氨氯地平样品适量，加少量甲醇溶解后加水制成60mg/ml的溶液，后用水稀释成6mg/ml的供试液。

测定法精密吸取溶液适量，置50ml量瓶中，加对二甲氨基苯甲醛试液20ml，再加水稀释至刻度，摇匀，反应2-5分钟在456nm波长处测定吸光度，以含相应浓度的对二甲氨基苯甲醛试液的水溶液为空白。