[发明专利]一种β-脱卤酶的基因及制备3-羟基丙酸的方法有效
| 申请号: | 201010536832.7 | 申请日: | 2010-11-09 |
| 公开(公告)号: | CN102051365A | 公开(公告)日: | 2011-05-11 |
| 发明(设计)人: | 吴坚平;常晓婷;林春娇;徐刚;杨立荣 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | C12N15/52 | 分类号: | C12N15/52;C12N1/21;C12N9/00;C12P7/42;C12R1/07 |
| 代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 陈昱彤 |
| 地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 脱卤酶 基因 制备 羟基 丙酸 方法 | ||
1.一种β-脱卤酶的基因,其特征是:具有如SEQ No.1所示序列。
2.一种芽孢杆菌,其特征是:其保藏号为CGMCC No.4196,含有具有如SEQNo.1所示序列的基因。
3.一种β-脱卤酶,其特征是:它由具有如SEQ No.1所示序列的基因所编码。
4.一种利用权利要求2的芽孢杆菌制备3-羟基丙酸的方法,其特征是包括以下步骤:
(1)将所述芽孢杆菌的具有如SEQ No.1所示序列的基因通过质粒导入宿主细胞,得到重组细胞;
(2)将所述重组细胞加入到离子缓冲溶液中破胞,离心得到上清液,将所述上清液经镍离子亲和层析柱和脱盐柱纯化得到纯酶液;
(3)将3-氯丙酸溶液加入到所述纯酶液中进行反应得到3-羟基丙酸,所述3-氯丙酸相对于3-氯丙酸溶液和纯酶液总量的摩尔浓度为10~50mmol/L。
5.根据权利要求4所述的制备3-羟基丙酸的方法,其特征是:步骤(3)中所述反应的温度为20~50℃。
6.根据权利要求4所述的制备3-羟基丙酸的方法,其特征是:所述宿主细胞为大肠杆菌。
7.根据权利要求4所述的制备3-羟基丙酸的方法,其特征是:所述离子缓冲溶液的摩尔浓度为100mmol/L、pH为4~10。
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