[发明专利]通过植物组织培养生产福建道地金线莲的方法

权利要求书

1.一种通过植物组织培养生产福建道地金线莲的方法，它包括如下步骤：

1.1植物体的选择及无菌处理：

选择5-10月份生长的福建道地金线莲野生健壮植物，除去根和叶进行清洗和无菌处理，将茎段剪成0.5-1.5CM带茎节的福建道地金线莲小段组织；

1.2诱导培养：

将经过无菌处理后的福建道地金线莲小段组织在诱导培养基中进行组织诱导培养丛生芽，培养周期：10-60天，培养温度：10-35℃，光照培养时间：0-24小时/天，光照强度：0～2000lux；所述的诱导培养基为：MS培养基+蔗糖10-50g/L+琼脂6-8g/L+活性炭2.0-3.0g/L+萘乙酸0.1-3.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤0.1-5.0mg/L，PH值为5.0-7.0；

1.3大规模培养：

将诱导的丛生芽在大规模培养基中进行大规模培养，培养周期：10-60天，培养温度：10-35℃，光照培养时间：0-24小时/天，光照强度：0～2000lux；所述的诱导培养基为：改良MS培养基+硝酸钙600mg/L+香蕉泥30-50g/L+蔗糖10-50g/L/L+琼脂6-8g/L+活性炭0.1-5.0g/L+萘乙酸1.0-2.0mg+6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.0mg，PH值为5.5-6.5。

2.按照权利要求1所述的通过植物组织培养生产福建道地金线莲的方法，其特征在于：所述的丛生芽诱导培养：培养周期：20-50天，培养温度：20-30℃，光照培养时间：8-16小时/天，光照强度：100～2000lux；所述的诱导培养基为：MS基本培养基+蔗糖20-40g/L+琼脂6-8g/L+活性炭2.0-3.0g/L+萘乙酸1.0-2.0mg/L+6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.0mg/L，PH值为5.5-6.5；所述的大规模培养：培养周期：20-50天，培养温度：20-30℃，光照培养时间：8-16小时/天，光照强度：1000～2000lux；所述的大规模培养基为：改良MS培养基+蔗糖20-40g/L琼脂6-8g/L+活性炭2.0-3.0g/L+萘乙酸1.0-2.mg/L+6-苄氨基腺嘌呤2.0-3.0mg/L，PH值为5.5-6.5。

3.按照权利要求1或2所述的通过植物组织培养生产福建道地金线莲的方法，其特征在于植物体的无菌处理方法包括如下步骤：

A、将选取的福建道地金线莲野生材料植株，用自来水冲洗2-3小时，用毛刷清洗干净，除去根和叶，再用蒸馏水冲洗，置超净工作台内；

B、将除去了根和叶的茎段植物用70-80％的酒精浸泡20-40秒进行表面灭菌，再用无菌水清洗干净；

C、将经过酒精灭菌的茎段植物体用0.3-0.8％次氯酸钠溶液浸泡消毒3-6分钟，用无菌水冲洗4-5次，再转入0.15％升汞溶液中灭菌8分钟，倒去灭菌液，用事先准备好的无菌水冲洗4-5次，再用滤纸吸干无菌水；

D、无菌条件下将消毒好的茎段剪成0.5-1.5CM带茎节的小段。