[发明专利]抗原多肽

权利要求书

1.包含一个DNA序列的分离的核酸分子，所述DNA序列选自由以下所构成的组：

(i)SEQ ID NO：1-13中所示的DNA序列；

(ii)与上述(i)中确定的SEQ ID NO：1-13所示序列杂交并编码由一种病原微生物表达的多肽的DNA序列；和

(iii)由(i)和(ii)中所限定的DNA序列的遗传密码所导致的简并的DNA序列。

2.如权利要求1所述的分离的核酸分子，其是基因组DNA。

3.如权利要求1或2所述的分离的核酸分子，所述核酸分子在严格的杂交条件下与SEQ ID NO：1-13所示的序列退火。

4.一种载体，其包含如权利要求1-3任一项所述的核酸分子。

5.如权利要求4所述的载体，其适于重组表达由所述核酸编码的多肽。

6.如权利要求4或5所述的载体，其是一种适合原核基因表达的表达载体。

7.如权利要求4或5所述的载体，其中所述载体是一种适合真核基因表达的表达载体。

8.如权利要求4至7任一项所述的载体，其中载体的适用性包括提供启动子序列。

9.如权利要求8所述的载体，其中启动子序列提供细胞特异性的，可诱导的或组成性的表达。

10.一种鉴别抗原多肽的方法，包括：

(i)提供一个核酸文库，其编码一种病原微生物的基因或部分基因序列；

(ii)转化/转染所述文库到一种宿主细胞中；

(iii)将由所述基因/部分基因序列表达的多肽与从感染或曾经感染所述病原微生物的动物得到的自体抗血清接触；和

(iv)纯化编码与所述自身抗血清结合的多肽或部分多肽的核酸。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述文库包含一种病原微生物的基因组DNA。

12.如权利要求10或11所述的方法，其中所述病原微生物是细菌。

13.如权利要求10至12任何一项所述的方法，其中所述细菌微生物选自以下：金黄色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；粪肠球菌；结核分枝杆菌；B族链球菌；肺炎链球菌；幽门螺杆菌；淋病奈瑟氏球菌；A族链球菌；布氏疏螺旋体；粗球孢菌；荚膜组织胞浆菌；B型脑膜炎奈瑟氏球菌；弗氏志贺氏菌；大肠杆菌；流感嗜血菌。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述病原微生物是金黄色葡萄球菌。

15.如权利要求13所述的方法，其中所述病原微生物是表皮葡萄球菌。

16.如权利要求10至15任何一项所述的方法，其中所述核酸文库是λ文库。

17.由如权利要求10至16任何一项所述的方法鉴定的多肽。

18.如权利要求17所述的多肽，其选自由SEQ ID NO：14-19组成的组中。

19.一种制备如权利要求17或18所述多肽的方法，包括：

(i)提供一种细胞及细胞培养条件，所述细胞被权利要求4至9任何一项所述的载体转化/转染；和

(ii)从所述细胞中或其生长环境中纯化所述多肽。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述载体编码并因此为所述重组多肽提供一种促进所述多肽纯化的分泌信号。

21.由权利要求4至9任何一项所述的载体转化或转染的细胞。

22.如权利要求21所述的细胞，其是一种原核细胞。

23.如权利要求21所述的细胞，其是选自真菌细胞、昆虫细胞、两栖动物细胞、哺乳动物细胞、植物细胞的一种真核细胞。

24.一种含有权利要求16或17所述的至少一种多肽的疫苗。

25.权利要求24所述的疫苗，其进一步包含一种载体和/或佐剂。

26.一种免疫动物抵抗一种病原微生物的方法，所述方法包含给该动物施用前述任一权利要求所述的至少一种多肽或其一部分，或前述任一权利要求所述的疫苗。

27.如权利要求26所述的方法，其中所述动物是人。