[发明专利]免疫多糖法培育广谱抗病海水养殖动物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种培育海水养殖动物(包括海参、海胆等海水养殖动物)的方法，特别是一种免疫多糖法培育广谱抗病海水养殖动物的方法。

背景技术

近年来，随着海水养殖环境恶化，海水养殖动物特别是海参、海胆等重要经济养殖动物病害频发，严重影响着重要经济养殖动物的产量，通过遗传育种手段，培育高产、抗逆海参、海胆等海水养殖动物新品种迫在眉睫。目前培育抗病海水养殖动物必须进行感染试验，要经过病原菌分离、培养、感染、计算存活率等途径，步骤繁琐，过程复杂，并且有些病原菌无法培养或培养困难，感染的最适剂量难以确定，风险性大。

发明内容

本发明的目的是提供一种过程简单、容易操作、无风险的免疫多糖法培育广谱抗病海水养殖动物的方法，克服现有技术的不足。

本发明的免疫多糖法培育广谱抗病海水养殖动物的方法，步骤如下：

a、建立至少100个海水养殖动物育种家系，每个家系的海水养殖动物数量至少100个，并使各家系的生长环境和饵料供应状况相同；

b、取上述海水养殖动物的成体，在每个家系中随机抽取10个海水养殖动物个体，测量每个海水养殖动物的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量；计算每个家系中海水养殖动物的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量的平均值B1，以此作为家系免疫活性的表征值；

c、利用多糖浸泡液对上述海水养殖动物个体进行免疫刺激，多糖浸泡液浓度为0.001g/L-0.007g/L，浸泡时间为24小时-72小时；

d、再次测量上述海水养殖动物个体的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量，计算刺激后刺免疫多糖每个家系中海水养殖动物的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量的平均值B2；

e、计算出免疫多糖刺激前后各家系免疫指标的改变量，根据海水养殖动物的种类不同和育种目标不同，确定加权值A，对各指标变化的绝对值进行加权；

f、计算各家系的平均综合选择指数I

I＝A_溶菌酶|B2-B1|_溶菌酶+A_SOD|B2-B1|_SOD+A_CAT|B2-B1|_CAT+A_{总抗氧化力}|B2-B1|_{总抗氧化力}+A_丙二醛|B2-B1|_丙二醛+A_吞噬效率×|B2-B1|_吞噬效率；

g、根据各家系的平均综合选择指数I，上选30％的家系，按雌雄比3∶1的比例，在避免近亲交配的情况下，再次建立海水养殖动物育种家系至少100个；

h、循环a～g步骤至少4次，获得广谱抗病海水养殖动物；

所述的海水养殖动物为海参、海胆等。

本明的免疫多糖法培育广谱抗病海水养殖动物的方法，实施过程简单，易控制，好操作，安全高效，无任何风险。

具体实施方式

以海胆为例，具体操作步骤如下：

a、建立120个海胆育种家系，每个家系的海胆数量150个，并使各家系的生长环境和饵料供应状况相同；

b、养殖6个月后，在每个家系中随机抽取10个海胆个体，测量每个海胆的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量；然后根据测量的参数计算出每个家系中海胆的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量的平均值B1，以此作为家系免疫活性的表征值；

c、利用多糖浸泡液对上述海胆个体进行免疫刺激，多糖浸泡液浓度为0.001g/L～0.005g/L，浸泡时间为24小时～72小时；其中多糖可为香菇多糖、黄芪多糖或脂多糖；

d、再次测量上述海胆个体的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量，并计算刺激后刺免疫多糖每个家系中海胆的溶菌酶、SOD、CAT、总抗氧化力活性和吞噬效率及丙二醛含量的平均值B2；

e、计算出免疫多糖刺激前后各家系免疫指标的改变量，对各指标变化的绝对值进行加权，在海胆中，A_溶菌酶为0.3，A_SOD为0.1，A_CAT为0.1，A_{总抗氧化力}为0.2，A_丙二醛为0.1，A_吞噬效率为0.2；

f、计算各家系的平均综合选择指数I