[发明专利]一种提取过氧化氢酶的方法无效
| 申请号: | 201010277443.7 | 申请日: | 2010-09-09 |
| 公开(公告)号: | CN102399759A | 公开(公告)日: | 2012-04-04 |
| 发明(设计)人: | 丁国才 | 申请(专利权)人: | 上海海帝园艺有限公司 |
| 主分类号: | C12N9/08 | 分类号: | C12N9/08 |
| 代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中 |
| 地址: | 201109 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 提取 过氧化氢酶 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种提取生物酶的提取方法,具体涉及一种提取过氧化氢酶的方法。
背景技术
过氧化氢酶存在于红细胞及某些组织内的过氧化体中,它的主要作用就是催化H2O2分解为H2O与O2,使得H2O2不至于与O2在铁螯合物作用下反应生成非常有害的-OH,几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。现在高中生物(必修)教材中基本都设置了“比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率”的实验。该实验探索的是酶的特性之一即高效性。教材建议用动物的肝脏来制备过氧化氢酶溶液,实验时,教师必须用新鲜的刚从动物体内取出的肝脏做为实验材料。如果肝脏不新鲜,效果就不好。但是在基层中学往往很难满足这样的要求,因此很多农村中学没有开设该实验。如果能够克服本实验中的取材难问题,提供一种高效方便的过氧化氢酶的提取方法,将会对教学产生极大的方便。
发明内容
本发明公开了一种取材方便,提取出的过氧过氢活性高的一种提取过氧化氢酶的方法,其技术方案如下:
一种提取过氧化氢酶的方法,包含以下步骤:
a.将植物种子置于无土培养容器中,加入培养液放置,环境温度保持在20~30℃,在该步骤中的植物种子,可以选自小麦、玉米、大豆等,优选小麦。
b.将放置了2~15天后的处于萌发状态的植物子研磨成均浆,放置的时间优先7天。
c.将步骤b中的均浆加入去离子水中搅拌,然后静置0.5~5小时,静置时间优选1~2个小时,取上层清液即得到高效的过氧化氢酶溶液。在该步骤后面还可以有一个后处理步骤,将含有匀浆的去子离水溶液进行常压过滤。这样的好处时可以将该溶液中的杂质去队,使过氧化氢酶的溶液更清彻透亮。
过氧化氢酶存在于所有已知的动物的各个组织中,特别在肝脏中以高浓度存在。但是这种提取材料一方面不方便,另一方面受到制备条件的限制,不能够随时随地的制备。
使用本发明的提取过氧化氢酶的方法其优点在于:
1.取材方便,因为动物的内脏内器官对于学生教育来说取材不易并且新鲜的内脏对于一些学校来说成本也比较高昂。
2.提取的过程中处理方便,不会引起残余物的粘附等情况造成实验器材的不易清洗。
3.该方法制备的过氧化氢酶溶液几乎无色,透明度高,对于实验现象来说更加明显、清楚。
具体实施例
下面将结合本发明的具体实施例对本发明的技术方案进行解释:
制备实施例:
制备步骤:实验前7天将小麦种子播种在铺有湿纱布的玻璃皿里,放在温暖的地方,纱布要经常保持湿润。实验时,称取40g萌发的小麦种子,放在研钵中,将其研磨成匀浆,然后转移到500mL的烧杯中,加满蒸馏水,搅拌均匀,静置1~2h,然后将该含有匀浆的去离子水常压过滤,得到澄清透亮的溶液,即为符合实验要求的过氧化氢酶溶液。
检测实施例:
实验器材:编号分别为1、2、3的三只5mL试管,蒸馏水,FeCl3溶液,过氧化氢溶液。
实验方法:将编号1、2、3的三只5mL试管内分别加入2mL的过氧化氢溶液,然后同步在1号试管内加入2滴制备实施例中制备的过氧化氢酶溶液,在2号试管中滴加2滴FeCl3溶液,在3号试管内滴加2滴蒸馏水,滴加完毕后观察三只试管的反应现象,同时进行记录,得到的数据制表如下:
表1:过氧化氢酶和Fe3+的催化效率比较
注:在该表中。“-”表示没有添加。所得到的实验现象均为目测得到的结果。
由该表可以得出:使用具体实施例1中的制备方法制备得到的过氧化氢酶溶液活性好,效率高,能够得了明显清楚的实验效果,并且从具体实施例二中得出得到的数据来看,过氧化氢酶的本身的性质也得到了确认和检测。
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