[发明专利]一种萘人工免疫原NA-BSA及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种萘人工免疫原NA-BSA，结构式如下：

其中BSA为牛血清白蛋白。

2.一种制备如权利要求1所述的萘人工免疫原NA-BSA的方法，包含以下步骤：

(1)萘半抗原的合成：将丁二酸酐、萘、无水三氯化铝按摩尔比1∶1∶2.2投料，并溶解于硝基苯中，得到无色液体，冰浴下搅拌反应，在0～4℃冰浴下进行7～8小时后，加入稀盐酸终止反应，将烧瓶中的液体倒出，加稀盐酸水解，分离出的有机层用大量稀盐酸水洗后，旋转蒸发除去硝基苯，得到棕黄色固体粉末，在甲醇-乙醚中重结晶获得黄色晶体状的萘半抗原NA，干燥后得纯品；

(2)萘人工免疫原的合成：将溶有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和N，N’-二环己基碳酰亚胺(DCC)的有机溶剂逐滴加入溶有萘半抗原的有机溶剂中，冰浴下搅拌反应3～4小时，离心分出上清液，加入到溶有BSA的磷酸缓冲液中，3～6℃反应12～16小时，将溶液装入透析袋，用pH6～8磷酸缓冲液透析3～6d；透析后离心分出上清液，即得萘人工免疫原NA-BSA偶联物，分装后-10℃～-40℃保存。

3.根据权利要求2所述的一种萘人工免疫原NA-BSA的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的萘的分子结构式为：

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的萘半抗原的化学名称为γ-氧-2-萘丁酸，分子量228，分子结构式为：

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的有机溶剂是N，N-二甲基甲酰胺(DMF)。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的半抗原、NHS、DCC摩尔比为1∶1.5∶1.5，半抗原、蛋白质摩尔比分别为200∶1。

7.一种萘人工免疫原NA-BSA的应用，通过免疫动物制备成萘特异性抗体，能与萘发生特异性免疫反应的免疫球蛋白IgG，用于现场检测水体、土壤及大气中痕量的萘。