[发明专利]一种水霉拮抗菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种芽孢杆菌，尤其涉及一种对鱼类水霉病有拮抗作用的芽孢杆菌，以及其作为生物安全用药的应用。

背景技术

水霉病(Saprolegniasis)是水产养殖中一类由水霉(Saprolegnia)或棉霉(Achlya)引起的寄生性疾病的统称。目前引起水产动物水霉病的最常见病原是水霉，传统上水霉病被认为是鱼类真菌病的一种。由于水霉比真菌要低等，分类学上，已将此纲生物从原真菌界划分为茸鞭生物界，故目前也认为水霉属卵菌纲。包括草鱼等四大家鱼在内的淡水鱼的鱼卵、鱼苗、成鱼都有可能得水霉病，一旦发生很难治疗。在晚冬和早春，水温15℃-20℃时发病最为严重。水霉菌包括有性和无性生长周期。研究表明水霉菌的无性生长周期是主要的感染阶段。水霉菌无性繁殖产生的孢子黏附到鱼的头部和鱼鳍上等表皮组织，也可以扩散至全身。水霉菌既可入侵和破坏鱼的皮下组织，造成伤痕和鱼的死亡；也可以在鱼的表皮生长，形成白色或者灰色的棉花状菌丝体，影响鱼的观感和价值。

以前能治疗水霉病最有效的化学试剂是孔雀石绿(Malachite Green)。然而，孔雀石绿是很强的致癌物质，我国已禁止使用孔雀石绿来治疗食用鱼的水霉病感染。国家对水霉病的研究非常重视，在农业部公益性行业科研专项和国家十一五支撑计划中都支持了水霉病的安全用药技术及孔雀石绿替代药物的研发。水霉病的严重危害也促使国内外的真菌学家和水产学家对其进行了研究，主要研究内容集中在水霉病的症状的描述，病原菌的鉴定，致病条件的探讨，以及防治方法的摸索。但是现有的水霉病防治药物治疗效果普遍不够理想，水霉病的防治问题仍没有很好的解决方案，见卢彤岩.水产养殖业孔雀石绿替代品研究现状[J].黑龙江水产，2009，130：22。

在现有化学药物尚未取得理想防治效果的情况下，我们将目光转向了微生物来源的药物的筛选。研究表明，微生物来源的很多活性成分可以抑制真菌的生长和感染，见下列文献：李海慧，徐风花，夏清梅，等.水稻立枯病拮抗菌株抗病机理研究[J].黑龙江农业科学，2007，(1)：38-40；郝华昆，韩俊华，李为民，等.棉花黄、枯萎病拮抗菌株B110的鉴定及其抑菌作用方式[J].植物保护，2007，33(2)：77-80；宋国彪，刘红彦，王振跃，等.拮抗菌96-79抑菌物质的理化特性研究[J].江西农业学报，2008，20(3)：40-42。生物药物通常具有无公害、无环境污染和防治作用专一性等优点，目前科学界公认生物防治将在健康养殖中发挥越来越大的作用。

在自然环境中往往存在大量的对各种病原菌(包括致病真菌)有拮抗作用的菌株。在追求可持续性发展的今天，利用拮抗菌防治病害是十分活跃的研究领域之一，特别是多种芽孢杆菌已被报道可作为植物病害的生防细菌，比如用于防治水稻真菌病稻瘟病的就有枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、短小芽孢杆菌(B.pumilis)和蜡状芽孢杆菌(B.cereus)等(见李永刚，宋兴舜，马凤鸣，等.水稻稻瘟病拮抗菌L1鉴定及抑菌特性的初步研究[J].微生物学通报，2008，35(6)：898-902)。

近年来芽孢杆菌作为益生菌在水产养殖中的应用范围不断扩大。已知芽孢杆菌的作用机制主要包括：抑制有害细菌的生长，维持肠道微生态平衡，改善养殖水体的水质，提高饲料利用率，促进动物生长等。起到拮抗作用的细菌分泌物是很复杂的，包括细菌素、小分子量的抗菌素、过氧化物、各种酶及许多次生代谢产物等。但此前报道的有拮抗真菌活性的多种芽孢杆菌的拮抗物质被证实具有蛋白质性质(见李永刚，郝中娜，杨明秀，等.寒地水稻病害生防菌株L1的鉴定及抑菌机理研究[J].东北农业大学学报，2008，39(7)：9-12)，由于蛋白质热稳定性不好及易受环境中蛋白酶的降解，不利于制药企业大规模纯化其活性成分用于生产实践。

发明内容

本发明要提供一种新型的拮抗菌，其活性成分稳定性高，可作为孔雀石绿替代药物的生物药源，降低环境污染，满足鱼类水霉病生物防治的需要。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

提供一种水霉拮抗菌Sh1，属于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，该菌种已于2010年6月2日在中国专利局指定的保藏单位，武汉，中国典型培养物保藏中心进行保臧，保藏号CCTCC NO：M 2010129。

本发明还提供所述的保藏号为CCTCC NO：M 2010129的水霉拮抗菌Sh1，在防治鱼类水霉病中的应用；尤其是在草鱼水霉病防治中的应用。