[发明专利]五味子组织培养的方法

说明书

技术领域

本发明属于用组织培养方法繁育五味子苗木技术。

背景技术

五味子[Schisandra chinensis(Turcz)Baill]是主产于我国东北的常用名贵中药材。由于野生资源逐年减少而社会需求逐年增加，五味子种植业悄然兴起。可靠的繁殖方法是许多种植物得以推广的先决条件。

植物的繁殖方法可分为两大类，即有性繁殖和无性繁殖。有性繁殖的后代具有双亲的遗传特性，有较强的生命力与变异性；无性繁殖因能稳定地保持原品种的特性和特征，一致性强，对果实类木本药用植物而言是培育生产用苗的主要方法。

国内一些科技工作者做了大量工作，如周鑫五味子组织培养，中国林副特产，第6～7页，2001年第4期；朱俊义北五味子愈伤的诱导，东北林业大学学报，第34卷第6期，2006年11月；陈雅君药用植物北五味子的组织培养，植物研究，第318～322页，第19卷第3期，1999年7月，均对五味子组织培养诱导增生培养基、生根培养基进行了研究并取得了成果。但仍然适应不了规模化繁育良种苗木的需要。

发明内容

本发明的目的在于解决现有技术存在的问题，提供一种五味子组织培养的方法，以满足五味子良种苗木快速繁育的需要。

本发明的技术方案是：一种五味子组织培养的方法，由外植体采集，外植体灭菌，切段与接种，培养基的灭菌，初代培养，继代培养，生根培养，移入苗圃程序组成，其特征是：以1/2B₅为基本培养基，以1/2B₅+BA0.1～0.6mg/L+NAA0.01～0.06mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L为诱导、增生培养基，用于初代和继代培养；生根培养于瓶内或瓶外进行。瓶内生根时，以WPM为基本培养基，以WPM+NAA0.2mg/L+蔗糖15g/L+琼脂9g/L为生根培养基；瓶外生根时，以珍珠岩和草炭为基质，上层为珍珠岩3～4厘米厚，下层为草炭5厘米厚；瓶外生根，幼苗基部用300～500mg/L吲哚丁酸浸沾后扦插到基质中，温度控制在26～28℃，瓶外生根时间25～45天。

本发明经过40多种培养基试验，确定1/2B₅为基本培养基，1/2B₅+BA0.1-0.6mg/L+NAA0.01-0.06mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L为诱导、增生培养基，与同类研究相比研究相比，接种后侧芽萌发时间缩短5～10天，诱导率提高10％，增值系数提高1.9～2.5倍，幼苗生长时间缩短了5～10天，大大提高了繁殖效率；在组培幼苗生根研究中，确定WPM为基本培养基，提出WPM+NAA0.2mg/L+蔗糖15g/L+琼脂9g/L为最佳生根培养基，幼苗生根率达到96.4％，与前人研究结果相比，生根率提高6.4％；首次以珍珠岩和草炭为基质(上层为珍珠岩3-4厘米厚，下层为草炭5厘米厚)进行了瓶外生根试验，幼苗基部用300-500mg/L吲哚丁酸浸沾后扦插到基质中，温度控制在26-28度，瓶外生根时间25-45天，生根率达到94.2％。

为使五味子大面积栽培健康发展，满足生产对良种苗木的大量需求，经过试验培养筛选出适宜的诱导、增生和生根培养基，为实现五味子试管苗工厂化生产奠定了好基础。新选育的单株或新引进的良种，利用试管繁殖，可在短期内提供大量的无性系苗木，以满足生产上的需要。利用此项技术用1个五味子芽1年内可繁殖40万株苗，由此可见其应用前景十分广阔。本研究目的在于探索五味子离体快繁的有效途径，以便建立快速高效的五味子离体快繁技术体系。

具体实施方式