[发明专利]一种祛痰止咳颗粒的检测方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种祛痰止咳颗粒的检测方法及其在检测祛痰止咳制剂中的应用，具体是一种祛痰止咳颗粒的指纹图谱检测方法及其在检测祛痰止咳制剂中的应用，属于药物分析技术领域。

【背景技术】

祛痰止咳颗粒是中药复方制剂，由党参、水半夏、芫花(醋制)、甘遂(醋制)、紫花杜鹃、明矾制成，具有健脾燥湿、祛痰止咳的功效，用于慢性支气管炎及支气管炎合并肺气肿，肺心病所引起的痰多、咳嗽、喘息等症，市场上同一处方的药物制剂还有祛痰止咳胶囊。祛痰止咳颗粒质量标准收载于中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十册中，标准编号：WS₃-B-2001-95，仅有紫花杜鹃、芫花、甘遂的薄层鉴别试验，没有含量测定项，检测特异性不足、难以控制产品质量。

中药成分复杂，以某一成分作为控制指标已经不适合中药质量控制的要求。中药指纹图谱是中药经处理后，采用一定的分析手段检测得到的，能够显示该中药及制剂中的各种组分群体特征的共有峰的图谱。它是一种综合的、可量化的化学鉴定手段，可以鉴别真伪，评价原料药材、半成品和成品质量的均一性和稳定性，体现了中药作用的整体性和模糊性。与单一成分作为控制指标的质量方法相比，指纹图谱具有全面性，可以很好地适应目前中药有效成分大多不明确这一特点。以指纹图谱作为中药(天然药物)提取物及其制剂的质量控制方法，已成为目前国际共识，是中药现代化的关键技术之一。目前尚无祛痰止咳颗粒的指纹图谱检测方法的相关报道。

【发明内容】

本发明的目的在于克服目前祛痰止咳颗粒检测方法的不足，提供一种特异性强、且同时具有定性检测和定量测定、有效可靠的祛痰止咳制剂的检测方法。本发明还进一步提供该检测方法在检测各祛痰止咳制剂的应用。

本发明提供采用高效液相色谱线性梯度洗脱在一个流动相系统同时检出颗粒中的四味药材成分，从色谱峰的特征和相似度结果判断颗粒制剂样品的合格与否，从整体上较全面反映药材内在质量的祛痰止咳颗粒或其他制剂高效液相色谱指纹图谱的检测方法。

本发明通过以下技术方案实现上述目的，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：精密称取祛痰止咳颗粒10.0～20.0g，用甲醇提取，滤过，取滤液适量，蒸干，净化，用甲醇配成祛痰止咳颗粒供试品溶液；

(2)混合对照品溶液的制备：精密称取含金丝桃苷、槲皮素、木犀草素、槲皮苷、芹菜素、芫花素适量，加甲醇使溶解，分别制成对照品溶液，例如可以配制成：金丝桃苷、槲皮素、木犀草素分别为0.1mg/ml，槲皮苷、芹菜素、芫花素分别为0.2mg/ml的对照品溶液；

(3)采用高效液相色谱法分析上述对照品溶液和供试品溶液，采用梯度洗脱法，色谱条件为：进样量10～30μl；例如可以采用色谱柱：Hypersil BDS C₁₈5μm(尺寸：4.6mm×250mm)；流动相由水相(用甲酸或冰醋酸酸或磷酸调至pH为3.0)、有机相甲醇组成，采用线性梯度洗脱，在洗脱时间T从0min～95min时，流动相中水相的比例从85％变化到30％，有机相甲醇的比例从15％变化到70％；柱温：30℃；检测波长：260nm；得到祛痰止咳颗粒高效液相色谱指纹图谱；

(4)根据对照品溶液的色谱图和供试品溶液的指纹图谱监控祛痰止咳颗粒的质量。

上述质量控制方法步骤(1)所述制备祛痰止咳颗粒供试品溶液是：取祛痰止咳颗粒适量，甲醇提取，回收甲醇，残渣用水溶解后转移到固相萃取柱，用水淋洗，弃去淋洗液，再用甲醇分次洗脱所述固相萃取柱，收集洗脱液，回收甲醇，残渣再用甲醇溶解，制成供试品溶液。更具体地，该步骤为：

取祛痰止咳颗粒最小包装10袋，混匀研细，取约10～20g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25～100ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，减压回收溶剂至干，残渣加水约5ml溶解，定量转移至固相萃取小柱(填料：ODS-C₁₈，规格：500mg，6ml)，加水20ml分次淋洗，淋洗液弃去，再用甲醇20ml分次洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至干，残渣定量加入甲醇2ml，使完全溶解，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为成品供试品溶液。