[发明专利]阿里红中总三萜酸提取方法无效
| 申请号: | 201010198879.7 | 申请日: | 2010-06-04 |
| 公开(公告)号: | CN101862353A | 公开(公告)日: | 2010-10-20 |
| 发明(设计)人: | 吴霞;罗容;邹海艳;于萍;徐硕 | 申请(专利权)人: | 首都医科大学 |
| 主分类号: | A61K36/062 | 分类号: | A61K36/062;G01N21/31;G01N30/02;G01N30/36;A61P11/00;A61P11/06;A61P11/10 |
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| 地址: | 100069 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 阿里 红中 总三萜酸 提取 方法 | ||
技术领域
本发明涉及阿里红中总三萜酸提取方法。
背景技术
阿里红[Fomes officinialis(Vill.ex.Fr.)Ames]是多孔菌科层孔菌属的真菌子实体。俗名苦白蹄,新疆维文版的《维吾尔医常用药材》一书中称阿里红为“落叶松茸”,维吾尔语为“哈里坤”。外形呈马蹄形,边缘不规则,大小不等,大的直径可达到30~40cm,小的5~10cm,子实体外部为棕黄色或灰白色,内部白色。收载于中华人民共和国卫生部药品标准《维吾尔药分册》。阿里红是新疆维吾尔民族医生的常用药物,民间验方也用以治病。维医认为阿里红入药性燥、热,有温胃祛痰、降气平喘、祛风除湿、消肿利尿之功用,是维吾尔医常用的治疗慢性气管炎的药材之一。药理实验表明阿里红具有温肺化痰、降气、活血消肿、利尿作用。为维吾尔药复方阿里红片的主要成分之一,主要用于祛痰平喘。
国外学者对阿里红的化学成分研究表明其主要成分为三萜酸、脂肪酸等,《维吾尔药志》中报道其含有多种三萜、甾体化合物,其中三萜酸含量可高达16%。
三萜类成分是很多药用真菌的有效成分之一,药用真菌在提高人体免疫功能、抗衰老及其他许多保健功能方面已受到高度重视,其种类多、分布广、繁殖快,在中国现代医药中起着重要作用,是中草药的一个重要的组成部分。阿里红中三萜酸类化合物有不少研究,但对三萜化合物标准化的提取工艺研究及含量测定方法未见文献报道,使提取物的质量控制难以实现,生物活性的研究结果,也就变得难以肯定。因而我们设计了三水平四因素正交试验,进行了阿里红三萜化合物的标准化提取方法研究。
发明内容
本发明的目的在于提供一种阿里红的提取物的制备方法。
本发明提供的阿里红的提取物的制备方法,包括如下步骤:取阿里红,对所述阿里红用提取溶剂进行提取,收集提取液,得到所述阿里红的提取物;
所述提取溶剂是60%-95%(体积百分比)乙醇水溶液;所述提取溶剂的用量是所述阿里红质量的8-12倍;所述提取的温度是80-100℃。
为了充分提取,阿里红可在提取之前先粉碎,过10目筛。
上述提取的方法具体可以是回流提取,所述回流提取的次数是2-4次,每次1-4小时,所述回流提取的温度是80-100℃。
在一个实施例中,上述提取溶剂可以是95%(体积百分比)的乙醇水溶液;所述提取溶剂的用量是所述阿里红质量10倍;所述回流提取的温度是100℃;所述回流提取的次数是3次,每次1-3小时。
在另一实施例中,上述提取溶剂是60-80%(体积百分比)的乙醇水溶液;所述提取溶剂的用量是所述阿里红质量8-10倍;所述回流提取的温度是80-100℃;所述回流提取的次数是2次,每次1.5-3小时。
进一步,上述回流提取的次数是2次,第1次回流提取的提取溶剂的用量是所述阿里红质量的10倍,所述第1次回流提取的时间是3小时;第2次回流提取的提取溶剂的用量是所述阿里红质量的8倍,所述第2次回流提取的时间是1.5小时;所述提取溶剂是60%或70%或80%(体积百分比)的乙醇水溶液;所述回流提取的温度是100℃。
上述方法还包括将所述提取液经过减压浓缩然后真空干燥至恒重,得到作为所述阿里红的提取物的固体粉末。
更进一步,上述制备方法还包括测定上述的固体粉末中总三萜酸含量,其步骤如下:
a)往上述固体粉末中加入5%香草醛-冰醋酸和高氯酸,密塞混匀,在50-70℃条件下反应20-30分钟,然后迅速置于冰浴上停止反应,得到显色溶液;所述5%香草醛-冰醋酸是将5g香草醛溶于冰醋酸中,再用冰醋酸定容至100mL后得到的溶液;其中固体粉末与5%香草醛-冰醋酸以及高氯酸的配比是(0.03-0.05)mg∶(0.2-0.8)ml∶(0.8-1.4)mL;
b)往步骤a)中的显色溶液中加入冰醋酸定容,在554nm波长处测吸光度值,然后根据标准曲线计算上述的方法制备得到的提取物中总三萜酸含量;其中定容后的体积与步骤a)中的固体粉末的配比是10mL∶(0.03-0.05)mg。
在步骤a)中,所述固体粉末与5%香草醛-冰醋酸以及高氯酸的配比是0.04mg∶0.5mL∶1.0mL;所述反应温度是60℃,反应时间是25分钟。
为了防止假阳性的出现,上述制备方法还包括测定上述的固体粉末中去氢硫色多孔菌酸(dehydrosulphurenic acid)含量,其步骤如下:
I)将上述固体粉末用甲醇作为溶剂进行溶解,得到样品溶液;
II)将步骤I)得到的样品溶液稀释后用滤膜过滤得到滤液;
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