[发明专利]一种提取残留阿维菌素的方法

说明书

技术领域

[0001]本发明涉及一种从抗生素废液中提取残留的有生物活性的抗生素组份的方法，尤其涉及一种从阿维菌素的结晶母液中分离提取有效组份B1和相关的生物活性组份的方法。

背景技术

阿维菌素，英文名称Avermectins，是由日本北里大学大村智等和美国Merck公司首先开发的一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物。阿维菌素自80年代初问世以来已广泛应用于动物寄生虫病防治和农作物害虫的防治。

阿维菌素共包括8个组分：A1a、A1b、A2a、A2b、B1a、B1b、B2a、B2b，主要有4种即A1a、A2a、B1a和B2a，其中avermectinB1a的生物活性最强。

阿维菌素的生产工艺过程如下：用经优选的高产斜面菌种制备液体菌种，然后发酵培养260小时左右，发酵结束，将发酵液经板框压滤，弃滤液，得菌丝体滤饼经干燥后用甲醇提取，之后脱溶剂并转相脱水溶性和部分醇溶性杂质，然后加入适量的甲醇或乙醇进行结晶，即可获得阿维菌素结晶（B1组份）和结晶母液。

在结晶母液中残留有阿维菌素（B1）和阿维菌素的同系物A1、A2、B2组份，母液中还含有8～18个碳的脂肪酸及其与甘油形成的酯类物质，以上组份在脱净溶剂后的母液中所占的百分比组成为：B1组份占5%左右；B2＋A2＋A1占40%左右；酯类杂质占50%左右。B1组份是现阶段广泛应用于动、植物以防治害虫和寄生虫的组份，A1、A2、B2组份同样具有杀虫活性，是有待于开发的组份。其中B2a组份是一种杀植物地下线虫活性较高的组份之一。然而，从母液中进一步采用结晶的方法直接分离其中残留的活性组份，几乎是不可能，这是因为大量的酯类杂质的存在和A组份不易结晶所致。

我国自1993年开始生产阿维菌素至今年产量已达2000吨左右，但是在结晶母液中残留有15%左右的阿维菌素（占总量的百分比）由于提取不出来而被弃之或非法出售，尚有阿维菌素B2a、A2a、A1a等活性成份均残留在母液中而未被合理应用，造成环境污染和资源浪费。

发明内容

本发明的目的是针对目前阿维菌素结晶母液活性成分难以提取的问题，提供一种提取残留阿维菌素的方法，它通过柱层析法在适当的温度压力控制下，使有效组分结晶收率达90%以上，从而满足了产业部门的需要，解决了人们长期渴望解决而未能获得成功的技术难题。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种提取残留阿维菌素的方法，包括以下步骤：

a、将结晶母液蒸馏脱除溶剂，获得脱溶剂后的第一油状液；

b、采用硅胶柱层析方法进一步分离第一油状液：柱层析用的固定相为硅胶，流动相为体积比为2/1的乙酸乙酯/石油醚，在柱温50℃～60℃、柱压大于0.5MPa的条件下进行洗脱，最先流出的组份为酯溶性杂质；在酯溶性杂质流出后改换单一溶剂乙酸乙酯为流动相，将阿维菌B1、A1、B2、A2四组份从柱子中洗脱出来，然后将洗脱液蒸馏脱除乙酸乙酯，获得含B1、A1、B2、A2四组份的第二油状液；

c、采用碳十八烷基硅烷柱层析方法拆分所述第二油状液中的B1、A1、B2、A2四组份：柱层析用的固定相为C18，流动相为体积比为(81～90)/(10～19)的甲醇/水，在柱温50℃～60℃、柱压大于0.5MPa的条件下洗脱，最先流出的组份为酯溶性杂质，其后依次为B2a、A2a、B1b、B1a、A1a，分别回收含B2a、B1b和B1a的洗脱液，最后减压蒸馏脱除溶剂获得B1a、B1b、B2a。

优选地，所述甲醇/水流动相的体积比为85/17。

本发明还提供了一种提取残留阿维菌素的方法，包括以下步骤：

a、将结晶母液蒸馏脱除溶剂，获得脱溶剂后的第一油状液；

b、采用硅胶柱层析方法进一步分离第一油状液：柱层析用的固定相为硅胶，流动相为体积比为2/1的乙酸乙酯/石油醚，在柱温50℃～60℃、柱压大于0.5MPa的条件下进行洗脱，最先流出的组份为酯溶性杂质；在酯溶性杂质流出后改换单一溶剂乙酸乙酯为流动相，将阿维菌B1、A1、B2、A2四组份从柱子中洗脱出来，然后将洗脱液蒸馏脱除乙酸乙酯，获得含B1、A1、B2、A2四组份的第二油状液；