[发明专利]开放式全细胞回收循环发酵生产光学纯L-乳酸的方法无效
| 申请号: | 201010148026.2 | 申请日: | 2010-03-24 |
| 公开(公告)号: | CN101805757A | 公开(公告)日: | 2010-08-18 |
| 发明(设计)人: | 许平;赵博;王丽敏;马延和;孙际宾;唐鸿志 | 申请(专利权)人: | 天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号: | C12P7/56 | 分类号: | C12P7/56;C07C59/08;C12R1/07 |
| 代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人: | 鲁兵 |
| 地址: | 300308 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 开放式 细胞 回收 循环 发酵 生产 光学 乳酸 方法 | ||
1.一种开放式全细胞回收循环发酵生产光学纯L-乳酸的方法,是以嗜热乳酸生产菌为菌种在发酵培养基中进行50℃~55℃下开放式发酵,发酵结束后对发酵液进行离心,去除菌体的上清液即为含有高光学纯度L-乳酸发酵液;离心后所得菌体再作为种子培养物接入下一批次发酵培养基中,以与上次发酵完全相同的发酵条件进行发酵培养,然后再对此次发酵液进行离心操作;如此循环多次,得到光学纯L-乳酸。
2.根据权利要求1所述的生产方法,其特征在于:所述嗜热乳酸生产菌为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)CASH CGMCC № 2184。
3.根据权利要求1或2所述的生产方法,其特征在于:所述发酵培养基配方为:葡萄糖130g/L,酵母粉2~20g/L,余量为水,pH值6.0。
4.根据权利要求1或2或3所述的生产方法,其特征在于:所述发酵条件为:发酵温度50℃~55℃,发酵时间40~48小时,搅拌转速130~150转/分,其间自动流加重量比为30%~40%碱液,控制发酵液pH值在6.0~6.5范围内。
5.根据权利要求4所述的生产方法,其特征在于:每次发酵的接种量不少于5%,发酵温度50℃,发酵时间48小时,搅拌转速150转/分钟,流加碱液为重量比为40%的氢氧化钠,发酵液pH值6.0。
6.根据前述任一权利要求所述的生产方法,其特征在于:每次发酵液均在非无菌条件下以离心方式回收菌体并将菌体用于循环发酵;具体的,所述发酵结束后的发酵液以6,000~8,000转/分转速在非无菌条件下离心20±2分钟;所述离心转速优选为8,000转/分。
7.根据前述任一权利要求所述的生产方法,其特征在于:所述循环发酵次数为2~8次。
8.根据权利要求7所述的生产方法,其特征在于:所述每次循环发酵中所用发酵培养基中,酵母粉含量逐次递增;例如,第一次发酵时发酵培养基中酵母粉含量为2g/L,第二次发酵时发酵培养基中酵母粉含量为10g/L,第三次发酵时发酵培养基中酵母粉含量为15g/L,第四次发酵时发酵培养基中酵母粉含量为20g/L。
9.根据权利要求1-8任一项所述的生产方法,其特征在于:所述凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)CASH CGMCC № 2184菌种在发酵前还需进行斜面培养和种子培养。
10.用权利要求1-9任一项所述方法获得的光学纯L-乳酸。
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