[发明专利]白花蛇舌草有效部位及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别是涉及一种白花蛇舌草有效部位及其制备方法、检测方法，以及其在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

白花蛇舌草是民间常用的一种中药，其味苦、甘、性寒，归心、肺、肝、大肠经。主要功效为清热解毒，利湿，抗癌，主治肺热喘咳、咽喉肿痛、肠痈疮疡、毒蛇咬伤、热淋涩痛、水肿、痢疾、肠炎、湿热黄疽、癌肿等。近年来，许多学者对白花蛇舌草的抗肿瘤作用进行了研究，其抗肿瘤的有效成分多而且较为复杂。但是迄今未见涉及白花蛇舌草有效部位及其制备方法和用途的专利。

发明内容

本发明的目的在于提供一种白花蛇舌草有效部位及其制备方法，还提供一种白花蛇舌草有效部位的检测方法，还提供一种白花蛇舌草在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明白花蛇舌草有效部位的制备方法为：

提取：取药材白花蛇舌草加8-16重量倍的45-80％乙醇，提取1-3次，每次1-3小时，合并提取液，浓缩；

纯化：以石油醚萃取浓缩物的水溶液2-5次，去除石油醚层，上D-101型大孔树脂柱，上样浓度为2.6-5.2mg/mL，按照2-6mL/min的吸附流速进行动态吸附，其中径高比为1∶4～1∶13，分别用水、10-30％、20-45％、25-60％乙醇溶液以2-5mL/min的流速进行洗脱，收集25-60％洗脱部分并蒸干，温度不高于60℃，真空干燥后即得白花蛇舌草有效部位，有效部位中6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯含量为50-85％。

本发明白花蛇舌草有效部位的检测方法为如下含量测定中的一种或几种：

本发明白花蛇舌草有效部位中总环烯醚萜苷的含量测定：

精密称取6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯对照品0.0015-0.0038重量份，置10mL量瓶中，加水6-10体积份，以功率250W，频率40kHz超声处理3-8分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，其中每1mL含6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯0.267mg；

取本发明白花蛇舌草有效部位0.02-0.04重量份，精密称定，置10mL量瓶中，加水6-12体积份，以功率250W，频率40kHz超声处理15-30分钟，放冷，用水稀释至刻度，摇匀，即得。

取0.2-0.8体积份待测溶液，置10mL量瓶中，50-85％乙醇加至2-8体积份，加入30-70％盐酸1-3体积份，摇匀，80℃水解15-40分钟，取出，立即冷却，加入1-3体积份对二甲氨基苯甲醛溶液，用50-85％乙醇定容，摇匀，室温放置20-45分钟，在640nm处用分光光度计测定溶液吸光度，根据回归方程计算本发明白花蛇舌草有效部位中总环烯醚萜苷的含量为85％-96％。

本发明白花蛇舌草有效部位中6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯含量测定：

色谱条件：色谱柱采用YMC-C18柱：250mm×4.6mm，5μm；检测波长为310nm；进样量为10μL，流速为1.0mL/min；柱温为30℃；以乙腈为流动相A，以0.05％甲酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，梯度条件为：时间0～15～20～30～60分钟，流动相A乙腈由15％～20％～20％～25％～25％；

对照品溶液的制备：精密称取6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯对照品适量，加40-60％甲醇制成每1ml含6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯0.105mg的溶液；精密量取上述6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯溶液0.5-1.5体积份，置10mL量瓶中，加40-60％甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml含6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯20.9μg的溶液；

供试品溶液的制备：取本发明白花蛇舌草有效部位0.0025-0.0048重量份，精密称定，置100mL量瓶中，加40-60％甲醇60-85体积份，以功率250W，频率40KHz超声处理8-12分钟，取出，放冷，加40-60％甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取滤液，即得；

测定法：分别精密吸取上述对照品溶液、及供试品溶液各0.008-0.012体积份，注入液相色谱仪，测定，即得。

本发明白花蛇舌草有效部位中含香豆酸以6-0-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯计为60-85％。

本发明所述的重量份与体积份的关系为g/ml的关系。

本发明白花蛇舌草有效部位可以单独、组合或与其它任何中西药物按任意比例配伍，加入常规辅料，按照常规工艺，制成胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂等药学上可接受的各种剂型。

其中注射液原料纯度大于80％。