[发明专利]一种人体β淀粉样蛋白试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种试剂盒，尤其是涉及一种人体β淀粉样蛋白试剂盒。

背景技术

人口老龄化是当今世界各国面临的重大社会问题，已经引起国际社会的广泛关注。据有关方面统计，我国北京、上海等大城市已迈入了老龄城市，下个世纪前半期我国就将进入老龄社会，老年人的心理及身体健康问题已提上了议事日程。人口老龄化一方面是我国经济和社会发展、人民生活水平提高、医疗卫生条件改善的结果，是社会文明进步的重要标志；另一方面，老年群体的增加关系国计民生，关系改革、发展、稳定大局，关系我国和谐建设。如今，“银色浪潮”正悄悄袭来，关注、关爱老人就更有具广泛而深远的意义。

老年痴呆症是老年人脑部功能失调的一种表现，是以智力衰退、行为及人格变化为特征。典型临床症状包括有记忆力、抽象思考、定向力障碍，同时伴有社会活动能力减退。主要表现为健忘、目光呆滞、口齿迟钝，继而影响知觉神经，失去自理能力。它已成为老年人健康的一大克星。据世界卫生组织估计，世界范围内65岁以上的老年人中，老年痴呆症患者已占到5％。国外的流行病学调查发现：老年痴呆是仅次于心血管病、脑血管病和恶性肿瘤，居第四位的老年人死因。有人预测，老年痴呆症将是下世纪最可怕的老年病。目前，老年痴呆症已引起许多老年病科学家、医学家们的关注，对其病因、诱发因素开展了广泛的实验研究。阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease AD)就是老年痴呆症中的一种。是我国各地区老年病研究中心重点关注的疾病之一。

阿尔茨海默病的特点是在脑细胞外有斑块存在与胞内有神经纤维原缠结存在。组成这些斑块的蛋白质是β-淀粉样蛋白(Aβ)，它是淀粉样前体蛋白经β-分泌酶和γ-分泌酶酶切后形成的40到43个氨基酸的多肽。在某些个体上，由于某些基因突变，或ApoE等位基因的表达，或其他尚未发现的因子的作用，导致了多肽的表达增加，而这些多肽Aβ42与Aβ43比Aβ40有更强聚集能力。所以，很多研究者推测Aβ42与Aβ43的增强释放导致了Aβ的异常沉积，并毒害受损个体的脑神经。在AD患者，脑脊液中Aβ42水平减少被认为是AD的前兆。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种操作方便、检测范围广、灵敏度高的人体β淀粉样蛋白试剂盒。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种人体β淀粉样蛋白试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括抗体包被板条、标准品、浓缩生物素化抗体、浓缩酶结合物、试剂稀释液、浓缩洗涤液、显色剂及终止液。

所述的抗体包被板条的制备包括以下步骤：用包被液将包被抗体稀释至1～2ug/ml，加在包被板上，用封板纸封板，在4-8℃放置12-24h后，将包被板置于洗板机上，用洗液洗板一次，然后加入封闭液并在室温下放置2h，甩净封闭液，风干，风干的包被板装入铝箔袋中，加入干燥剂，密封即得抗体包被板条。

所述的包被液为pH值为7.2-7.4磷酸盐缓冲液，所述的包被抗体为鼠抗人β淀粉单抗，所述的洗液为吐温20含量为0.1％(V/V)的磷酸盐缓冲液，所述的封闭液为含有血清白蛋白为2％(W/V)，蔗糖为3wt％的磷酸盐缓冲液。

所述的标准品的制备包括以下步骤：以pH值为7.2-7.4，含血清白蛋白为5wt％的磷酸盐缓冲液为溶剂，将人β淀粉重组蛋白配制成2000pg/50ul/支的溶液，将该溶液置于-70℃低温环境中冻干2h，然后将其置于冷冻干燥机中冻干8～12h，密封即得标准品。

所述的浓缩生物素化抗体为维生素H标记的抗人β淀粉抗体。

所述的浓缩酶结合物为辣根过氧化物酶标记的链亲和素。

所述的试剂稀释液为pH值为7.2-7.4，牛血清白蛋白含量为1％(W/V)的磷酸盐缓冲液。

所述的浓缩洗涤液为pH值为7.2-7.4，吐温20含量为0.1wt％(V/V)的磷酸盐缓冲液。

所述的显色剂为四甲基联苯二胺。

所述的终止液为1N HCL(1N盐酸)。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

(1)本发明的抗体包被板条制备方法采用两步法、室温振荡的反应模式，此方法具有操作简便，反应快捷，对实验室条件及设备要求不高，易于掌握和推广；

(2)本发明的检测范围较广，其检测范围为0～1000pg/ml；

(3)本发明的灵敏度较高，其检测灵敏度最高可达7pg/ml；

(4)本发明的工艺、技术、质量及使用效果都达到了国内外领先的水平。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。