[发明专利]用于在表达HBx的哺乳动物细胞中生产重组蛋白的方法和组合物

权利要求书

1.一种在培养中的哺乳动物宿主细胞中生产异源蛋白质的方法，包括在使得所述哺乳动物宿主细胞表达HBx和所述异源蛋白质的条件下培养选自下组的哺乳动物宿主细胞：HKB11细胞、CHO细胞、BHK21细胞、C2C12细胞、和HEK293细胞，其中所述哺乳动物宿主细胞含有编码HBx的核酸和编码所述异源蛋白质的核酸。

2.一种在培养中的哺乳动物宿主细胞中生产异源蛋白质的方法，包括在使得所述哺乳动物宿主细胞表达HBx和所述异源蛋白质的条件下以非粘附悬浮培养方式培养哺乳动物宿主细胞，其中所述哺乳动物宿主细胞含有编码HBx的核酸和编码所述异源蛋白质的核酸。

3.一种在培养中的哺乳动物宿主细胞中生产异源蛋白质的方法，包括：a)提供含有编码HBx的核酸并含有提供外源XBP1s的核酸的哺乳动物宿主细胞；并b)在使得所述哺乳动物细胞表达HBx、外源XBP1s、和所述异源蛋白质的条件下培养所述哺乳动物细胞。

4.权利要求1或2之一的方法，其中将所述编码HBx的核酸转染入所述哺乳动物宿主细胞中并瞬时表达。

5.权利要求3的方法，其中将所述编码HBx的核酸和/或所述提供XBP1s的核酸转染入所述哺乳动物宿主细胞中并瞬时表达。

6.权利要求1至5之一的方法，其中所述培养包括培养基，并且将所述异源蛋白质分泌入所述培养基中。

7.权利要求1至6之一的方法，进一步包括回收和/或进一步纯化所述异源蛋白质。

8.权利要求1至3之一的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞稳定地表达所述编码HBx的核酸。

9.权利要求1至3或8之一的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞稳定地表达所述编码异源蛋白质的核酸。

10.权利要求1至3或8之一的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞瞬时地表达所述编码异源蛋白质的核酸。

11.权利要求3的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞稳定地表达所述提供外源XBP1s的核酸。

12.权利要求2或3之一的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞是非肝细胞起源的。

13.权利要求2的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞是DG44sus细胞。

14.权利要求2的方法，其中所述哺乳动物宿主细胞是HEK293细胞。

15.一种组合物，其包含含有编码异源蛋白质的核酸和编码HBx的核酸的哺乳动物宿主细胞，其中所述哺乳动物宿主细胞源自选自下组的细胞系：HKB11细胞、CHO细胞、BHK21细胞、C2C12细胞、和HEK293细胞，且其中所述细胞表达或能诱导表达HBx和所述异源蛋白质。

16.一种组合物，其包含不依赖贴壁哺乳动物宿主细胞的悬浮培养物，所述哺乳动物宿主细胞含有编码HBx的核酸和编码异源蛋白质的核酸，且所述哺乳动物宿主细胞表达或能诱导表达HBx和所述异源蛋白质。

17.一种包含哺乳动物宿主细胞的组合物，所述哺乳动物宿主细胞含有：

(a)编码HBx的核酸，

(b)提供外源XBP1s的核酸，和

(c)编码异源蛋白质的核酸，

其中所述哺乳动物宿主细胞表达或能诱导表达HBx、外源XBP1s和所述异源蛋白质。

18.权利要求15或16之一的组合物，其中所述哺乳动物宿主细胞稳定地表达HBx和/或所述异源蛋白质。

19.权利要求17的组合物，其中所述哺乳动物宿主细胞稳定地表达HBx、XBP1s、和/或所述异源蛋白质。

20.权利要求15或16之一的组合物，其中所述哺乳动物宿主细胞瞬时表达HBx和/或所述异源蛋白质。

21.权利要求17的组合物，其中所述哺乳动物宿主细胞瞬时表达HBx、XBP1s、和/或所述异源蛋白质。