[发明专利]因子IX的定点修饰

权利要求书

1.因子IX多肽，其包含至少一处选自R338A和V86A的突变和至少一处选自下组的半胱氨酸取代：T148C、V153C、T163C、L165C、N167C、T169C、T172C、F175C、K201C、K247C、K413C、L414C、和T415C。

2.权利要求1的因子IX多肽，其包含突变R338A和V86A。

3.权利要求1或2的因子IX多肽，其中所述至少一个取代的半胱氨酸是与生物相容性聚合物偶联的(conjugate)。

4.权利要求3的因子IX多肽，其中所述生物相容性聚合物选自下组：聚(亚烷基二醇)、聚(乙氧基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡硌烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(甲基丙烯酸羟烷基酯)、聚(糖)、聚(α-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚唾液酸、羟乙基淀粉(HES)、聚环氧乙烷、烷基-聚环氧乙烷、双聚环氧乙烷、和右旋糖苷(dextran)。

5.权利要求4的因子IX多肽，其中所述聚(亚烷基二醇)是聚乙二醇。

6.权利要求4的因子IX多肽，其中所述聚乙二醇是线性的或分支的。

7.权利要求5或6的因子IX多肽，其中所述聚乙二醇具有范围为3,000道尔顿至150,000道尔顿的名义平均分子量。

8.权利要求5或6的因子IX多肽，其中所述聚乙二醇具有范围为5,000道尔顿至85,000道尔顿的名义平均分子量。

9.权利要求3至8中任一项的因子IX多肽，其中相对于未偶联的多肽，与所述聚合物的偶联将所述多肽的血清半衰期增加至少30％。

10.权利要求1至9中任一项的因子IX多肽，其中所述多肽具有每mg多肽至少100个单位的比活。

11.因子IX多肽，其包含T169C、K201C、K247C、或L414C取代。

12.权利要求11的因子IX多肽，其进一步包含至少一处选自R338A和V86A的突变。

13.权利要求11或12的因子IX多肽，其包含突变R338A和V86A。

14.权利要求11至13中任一项的因子IX多肽，其中选自第169位、第201位、第247位、和第414位的半胱氨酸残基是与生物相容性聚合物偶联的。

15.权利要求14的因子IX多肽，其中所述生物相容性聚合物选自下组：聚(亚烷基二醇)、聚(乙氧基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯基吡硌烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(甲基丙烯酸羟烷基酯)、聚(糖)、聚(α-羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚唾液酸、羟乙基淀粉(HES)、聚环氧乙烷、烷基-聚环氧乙烷、双聚环氧乙烷、和右旋糖苷。

16.权利要求15的因子IX多肽，其中所述聚(亚烷基二醇)是聚乙二醇。

17.权利要求15的因子IX多肽，其中所述聚乙二醇是线性的或分支的。

18.权利要求16或17的因子IX多肽，其中所述聚乙二醇具有范围为3,000道尔顿至150,000道尔顿的名义平均分子量。

19.权利要求16或17的因子IX多肽，其中所述聚乙二醇具有范围为5,000道尔顿至85,000道尔顿的名义平均分子量。

20.权利要求14至19中任一项的因子IX多肽，其中相对于未偶联的多肽，与所述聚合物的偶联将所述多肽的血清半衰期增加至少30％。

21.权利要求11至19中任一项的因子IX多肽，其中所述多肽具有每mg多肽至少100个单位的比活。

22.因子IX多肽，其包含氨基酸残基160-164之间引入的至少一个半胱氨酸氨基酸。

23.权利要求22的因子IX多肽，其包含在氨基酸残基160-161之间、氨基酸残基161-162之间、氨基酸残基162-163之间、和氨基酸残基163-164之间引入的1-5个半胱氨酸氨基酸。

24.权利要求22或23的因子IX多肽，其进一步包括至少一处选自R338A和V86A的突变。