[发明专利]过滤方法

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白制剂制造工序中的病毒清除工序中的蛋白制剂中间制品的过滤方法以及该方法中使用的病毒清除过滤器。

背景技术

由于担心在抗体药品、重组蛋白药品、血浆制剂、血浆分级制剂等蛋白制剂中混入来源于原料、来源于工序的病毒，因而在制造这些蛋白制剂的过程中需要对病毒进行失活或者清除。

作为可能会混入蛋白制剂中的病毒的失活方法，可以进行加热处理或使用化学药品的处理等，但仅通过这些单独的处理病毒的失活并不充分，另外这些方法可能会使蛋白制剂中的有用蛋白质本身变性。在此背景下，作为不伴随化学变性的物理性病毒消除方法，使用过滤膜来分离清除病毒。

作为病毒清除用的过滤膜，已知有由纤维素之类的天然材料形成的膜、或者由聚偏氟乙烯(PVDF)、聚醚砜(PES)之类的合成高分子材料形成的病毒清除膜(非专利文献1～4)。

利用装填了这些病毒清除膜的病毒清除装置进行的蛋白制剂中间制品的过滤，希望能够在短时间内过滤更多量的蛋白质，并且能够以充分高的病毒清除性能清除病毒。但实际上，例如纤维素膜在即使20mg/ml以上的蛋白质浓度下也能够进行过滤而不易发生膜堵塞，但耐压性低，实际使用压力只能提高到100kPa左右，或者，合成高分子膜虽然耐压性高、实际使用压力即使提高到300kPa左右也没问题，但若蛋白质浓度提高至20mg/ml左右则存在引起膜的堵塞、造成无法过滤的问题。因此，一般只能进行10mg/ml以下的低浓度下的过滤(专利文献1)。

从这些理由来看，在使通过各种色谱法或超滤法等纯化工序浓缩了的、高蛋白质浓度的蛋白制剂中间制品在高压下流过病毒清除装置的过滤条件下的过滤方法的研究并没有进展，另外适用于该方法的病毒清除过滤器的开发也没有进展。

另外蛋白制剂中间制品是用于制造蛋白制剂的贵重材料，且在制造规模中确定病毒清除工序的过滤方法、运转条件在时间上经济上都伴随着困难，因此本发明人强烈意识到，预先在小规模中确定了病毒清除工序的过滤方法、蛋白制剂中间制品的蛋白质浓度、病毒清除过滤器的入口压力、和/或过滤时间的运转条件，并将其应用于放大后的蛋白制剂的制造工序的重要性。

专利文献1：日本特开2004-277323号公报

非专利文献1：Manabe.S，Removal of virus through novelmembrane filtration method.，Dev.Biol.Stand.，(1996)88：81-90.

非专利文献2：Brandwein H等.，Membrane filtration for virus removal.，Dev Biol(Basel).，(2000)102：157-63.

非专利文献3：Aranha-Creado等，Clearance of murine leukaemia virus from monoclonal antibody solution by a hydrophilic PVDF microporous membrane filter.，Biologicals.(1998)Jun；26(2)：167-72.

非专利文献4：L.Moce-Llivina等，Comparison of polyvinylidene fluoride and polyether sulfone membranes infiltering viral suspensions，Journal of Virological Methods，(2003)April，Vol.109，Issue 1，Pages 99-101.

发明内容

发明要解决的问题

鉴于上述问题，本发明的课题在于提供在使高蛋白质浓度的蛋白制剂中间制品在高压力下流过病毒清除过滤器的条件下的、蛋白制剂制造工序中的病毒清除工序的过滤方法，并提供该方法中使用的病毒清除过滤器。

用于解决问题的方案