[发明专利]端粒酶反应的抑制方法

说明书

技术领域

本发明涉及抑制由端粒酶引起的DNA延伸反应的方法。

背景技术

端粒(Telomere)是由位于真核生物的染色体两个末端部分的DNA和各种蛋白质组成的结构。在人的情况下，处于该端粒部分的DNA(以下简单称为“端粒DNA”)以5’-TTAGGG-3’(序列号：1)的6个碱基的重复序列的形式大约存在1万个碱基对，在3’末端突出100个碱基左右(overhang：悬端)而形成单链。

根据迄今为止的研究可知，通常的体细胞中的端粒DNA每逢进行细胞分裂就会变短，如果到了5000个碱基对左右，则到达分裂寿命的极限，不能再进行分裂的细胞最终凋亡。

但是，另一方面，已知在70～80％的癌细胞中，将变短的端粒DNA再次延伸的端粒酶的活性非常高，从而使该细胞不会达到分裂寿命而持续分裂。因此，近年来，由该端粒酶引起的端粒DNA延伸反应(以下简单称为“端粒酶反应”)据认为是在癌治疗中的重要标的，对该反应的抑制剂和抑制方法的研究也在积极的进行中。

各种端粒酶反应的抑制方法被提出，其中，有通过稳定G-quadruplex结构的抑制方法。所谓G-quadruplex结构，是由富含鸟嘌呤碱基的DNA序列形成的四链DNA结构，端粒DNA序列(5’-TTAGGG-3’，序列号：1)的单链部分也是能够形成G-quadruplex结构的序列。

由于端粒酶不能与G-quadruplex结构结合，所以，如果能够使G-quadruplex结构在端粒DNA中稳定地存在，就能够抑制端粒酶反应。因此，迄今为止，提出了通过利用各种化合物来稳定G-quadruplex结构的端粒酶反应抑制方法。

在专利文献1中报告了由吡唑啉酮衍生物产生的端粒酶反应抑制效果。在专利文献2中报告了由通式：具有季氮原子的含氮芳香环-(NR3)_p-CO-分配剂-(CO)_m-(NR’3)_q-X-芳香环或非芳香环构成的化合物产生的端粒酶反应抑制效果。另外，在专利文献3中报告了由下述(化1)结构组成的化合物产生的端粒酶反应抑制效果。

[化1]

在非专利文献1、非专利文献2、非专利文献3中分别报告了由端粒酶素(Telomestatin)、Phen-DC3、360A产生的端粒酶反应抑制效果。另外，还在非专利文献4中报告了由TMPyP4产生的端粒酶反应抑制效果。在这些以外，还报告了例如二萘嵌苯衍生物和喹啉及喹啉相关物质具有同样的抑制效果。

专利文献1：日本特开2005-289874号公报

专利文献2：日本特表2006-518726号公报

专利文献3：日本特表2004-505082号公报

非专利文献1：J.Am.Chem.Soc.(2002)124，2098-2099

非专利文献2：J.Am.Chem.Soc.(2007)129，1856-1857

非专利文献3：Oncogene(2005)24，2917-2928

非专利文献4：J.Am.Chem.Soc.(1998)120，3261-3262

发明内容

在上述抑制端粒酶反应相关的化合物中，最重要的一点是必须不与双螺旋结构的DNA相互作用，而与G-quadruplex结构特异性地结合。

这是由于大多数基因组DNA都是双螺旋结构，这些化合物与基因组DNA非特异性地相互作用就会造成细胞毒性。更具体而言，如果这些化合物对双螺旋结构的DNA也非特异性地结合的话，甚至会抑制在DNA复制中所必须的由聚合酶进行的DNA延伸反应。

迄今为止，出于通过稳定G-quadruplex结构来抑制端粒酶反应的目的而开发的化合物都是电中性或阳离子性的。这是因为DNA本身是阴离子性，所以，从与G-quadruplex结合的观点来考虑，阴离子性化合物会引起静电排斥，认为在结合反应中是不利的。因此，以通过稳定G-quadruplex结构来抑制端粒酶反应作为目的时，没有考虑使用阴离子性化合物。

在以上的背景下，本发明的发明人进行了深入研究，结果发现，阴离子性的酞菁和G-quadruplex结构特异性地相互作用，且具有很高的端粒酶反应抑制效果，从而完成了本发明。

解决上述课题的本发明涉及一种端粒酶反应抑制方法，抑制由端粒酶引起的DNA延伸反应，其特征在于，以阴离子性酞菁作为端粒酶抑制剂，使之与作为端粒酶底物的DNA反应。