[发明专利]用于生产生物分子的方法和设备

权利要求书

1.生产并非被宿主细胞分泌的目标生物分子的方法，其包括如下步骤：

a)培养宿主细胞从而生产目标生物分子以及任选收获和重悬细胞，

b)通过碱裂解破碎细胞，

c)中和步骤b)中得到的溶胞产物，由此形成沉淀物，

d)将澄清的溶胞产物与步骤c)得到的沉淀物分离，

e)纯化目标生物分子，

其中，在步骤a～c)中的至少一步中加入碳酸盐，从而由于步骤c)中的中和，CO₂被释放出，以及在步骤d)中可以通过澄清设备来分离沉淀物和溶胞产物。

2.权利要求1所述的方法，其中，在步骤d)中获得的所述澄清的溶胞产物通过位于底部的出口离开澄清反应器/设备。

3.权利要求1所述的方法，其中，在步骤a)中加入所述碳酸盐。

4.权利要求1所述的方法，其中，在步骤b)中加入所述碳酸盐。

5.权利要求1所述的方法，其中，在步骤c)中加入所述碳酸盐。

6.权利要求1～5所述的方法，其中，在得到的溶胞产物-絮凝物混合物(附着有CO₂气泡)中计算出的理论碳酸盐浓度的范围为约0.003～约0.35M。

7.权利要求6所述的方法，其中，在得到的溶胞产物-絮凝物混合物(附着有CO₂气泡)中计算出的理论碳酸盐浓度的范围为约0.005～约0.05M。

8.权利要求1～7所述的方法，其中，所述碳酸盐为NaHCO₃。

9.权利要求1所述的方法，其中，步骤d)以半连续或连续方式运转。

10.设备，其用于以半连续方式进行权利要求1所述方法的步骤d)，其包括装备有下述部分的容器：

a)在其下部的滞留层，

b)位于滞留层上的入口，

c)在滞留层下的出口，以及

d)一个或多个可以到达至滞留层表面的分散装置，且均匀和温和地分散在该容器中经由碱裂解以及中和获得的沉淀物和溶胞产物的混合物。

11.权利要求10所述的设备，其还包括用于提供压缩气体的装置。

12.设备，其用于以连续方式进行权利要求1所述方法的步骤d)，其包括容器，所述容器装备有：

a)两个出口，其中一个位于柱体的顶部，另一个位于容器的底部，以及

b)在两个出口之间的入口。

13.权利要求12所述的设备，其中，所述容器上连接有附加的排液和/或清洗单元。

14.权利要求1所述的方法，其中，选自步骤b)～e)中的至少一个步骤以连续方式运转。

15.权利要求1所述的方法，其中，使选自步骤b)～e)中的至少两个步骤的组合通过连接该两个或多个单独步骤以连续方式运转。

16.权利要求14或15所述的方法，其中，通过连接至步骤b)，步骤a)也以连续方式运转。

17.权利要求14～16所述的方法，其中，至少一个步骤以自动模式运转。

18.权利要求1所述的方法，其中，将沉淀物的清洗步骤插入步骤d)和步骤e)之间。

19.权利要求18所述的方法，其中，所述清洗步骤由权利要求13的附加的排液/清洗单元来进行。

20.权利要求1所述的方法，其中，将浓缩和/或调节步骤(还包括过滤)插入到步骤d)和步骤e)之间。

21.权利要求18所述的方法，其中，所述浓缩步骤在所述调节步骤之前进行。

22.权利要求1所述的方法，其中，所述步骤d)的溶胞产物含有目标生物分子。

23.权利要求1所述的方法，其中，所述目标生物分子是多核苷酸。

24.权利要求22所述的方法，其中，所述多核苷酸是DNA。

25.权利要求23所述的方法，其中，所述DNA为质粒DNA。

26.权利要求1所述的方法，其中，在步骤a)中得到的细胞质(cell mass)经冷冻为粒状沉淀(cryo-pelleted)。