[发明专利]一种微生物液态发酵制备菜籽肽的方法

权利要求书

1. 一种微生物液态发酵制备菜籽肽的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将菜籽粕粉与营养液混合制备液态发酵培养基；

（2）将有产蛋白酶能力的菌种接入液态发酵培养基，进行液态发酵；

（3）发酵后的液态培养基经固液分离，得到菜籽肽的粗提液；

（4）粗提液经提纯得到菜籽肽；

所述有产蛋白酶能力的菌种为枯草芽孢杆菌，步骤（1）中，菜籽粕粉与营养液按固液比1：15~1：20g/mL配制液态发酵培养基，其中营养液中包括葡萄糖0.1%～2%，MnSO₄ 0.1%～2.0%，pH为8.5~9.5，上述百分比为质量体积百分比。

2.如权利要求1所述的微生物液态发酵制备菜籽肽的方法，其特征在于步骤（1）中，菜籽粕粉的粒径不大于200μm。

3.如权利要求1或2所述的微生物液态发酵制备菜籽肽的方法，其特征在于步骤（2）中，将有产蛋白酶能力的菌种接入液态发酵培养基，使菌体浓度为10⁵~10⁷个/mL，发酵温度20~40℃，发酵时间1~5天。

4.如权利要求3所述的微生物液态发酵制备菜籽肽的方法，其特征在于步骤（2）中，有产蛋白酶能力的菌种经活化、扩大培养得到菌体浓度为10⁷~10⁸个/mL的种子液，接入液态发酵培养基。

5.如权利要求1或2所述的微生物液态发酵制备菜籽肽的方法，其特征在于步骤（4）中，所述提纯方法包括离子交换、疏水层析和凝胶过滤，收集具有抗氧化生物活性的组分，经冷冻干燥得到抗氧化性专一的菜籽肽。

6.如权利要求1或2所述的微生物液态发酵制备菜籽肽的方法，其特征在于步骤（4）中，所述提纯方法包括超滤膜分离收集不同分子量的滤液，然后将滤液采用离子交换树脂或反渗透脱盐。