[发明专利]原位QCM环介导恒温核酸扩增快速检测方法有效
| 申请号: | 200910227444.8 | 申请日: | 2009-12-11 |
| 公开(公告)号: | CN102094079A | 公开(公告)日: | 2011-06-15 |
| 发明(设计)人: | 崔学晨;李燕国;俞宏;张利群;崔实 | 申请(专利权)人: | 崔学晨 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;G01N5/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 450009 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 原位 qcm 环介导 恒温 核酸 扩增 快速 检测 方法 | ||
1.一种原位QCM环介导恒温核酸扩增快速检测方法,通过使用特异性引物,利用环介导恒温核酸扩增LAMP技术平台扩增靶基因的特定区域,其特征在于,将引物固定于石英晶体微天平QCM电极上,在安装该电极的QCM检测池中配置反应体系,在63-65℃恒温反应的同时,利用石英晶体微天平(QCM)技术进行在线检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述引物固定是,采用巯基化试剂分子组装方法,将环介导恒温扩增反应体系中的4个引物(4个引物包括2个内引物FIP和BIP、2个外引物F3和B3)之一固定于QCM电极上。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于,所述配置反应体系是,在安装所述电极的QCM检测池中分别加入另三条引物、反应缓冲液、BstDNA聚合酶、模板DNA及双蒸水。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述在线检测是,用QCM仪器在线检测频率变化,在10分钟内观察到频率发生周期性波动变化,频率曲线呈锯齿状,说明体系中发生了扩增反应,则判定试样含有靶基因即为阳性,否则为阴性。
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