[发明专利]一种利用大孔吸附树脂富集纯化瓦松中叶酸的方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种叶酸的纯化方法，特别是涉及一种利用大孔吸附树脂富集纯 化瓦松中叶酸的方法。

背景技术：

瓦松：中药材，【异名】昨叶荷草(《唐本草》)，屋上无根草(《经验良方》)，向天草(《庚辛 玉册》)，瓦花(《摘元方》)，石莲花、厝莲(《福建民间草药》)，干滴落(《东北药植志》)，猫头 草、瓦塔(《河北药材》)，天蓬草(《中药材手册》)，瓦霜、瓦葱(《四川中药志》)，酸塔、塔松、 兔子拐杖、干吊鳖、石塔花、狼爪子、酸溜溜(《辽宁经济植物志》)，瓦宝塔、瓦莲花、岩松、屋 松、岩笋、瓦玉(《浙江民间常用草药》)。多年生肉质草本，高10～40厘米。茎略斜伸，全体粉 绿色。基部叶成紧密的莲座状，线形至倒披针形，长2～3厘米，绿色带紫，或具白粉，边缘有流 苏状的软骨片和1针状尖刺。茎上叶线形至倒卵形，长尖。花梗分枝，侧生于茎上，密被线形或为 长倒披针形苞叶，花成顶生肥大穗状的圆锥花序，幼嫩植株上则排列疏散，呈伞房状圆锥花序；花 萼与花瓣通常均为5片，罕为4片；萼片卵圆形或长圆形，基部硝合生；花瓣淡红色，膜质，长卵 状披针形或长椭圆形；雄蕊10，儿与花瓣等长；雌蕊为离生的5心皮组成，花柱与雄蕊等长。蓇 葖果。花期7～9月。果期8～10月。生于屋顶、墙头及石上。全国各地均有分布。全草含大量叶 酸。

叶酸是一种存在于天然植物中维生素B复合体之一，具有帮助调节胚胎神经细胞发育，防止新 生婴儿患先天性神经管缺陷症、制造红血球不可缺少物质(与B12)，预防治疗叶酸贫血症、保护 粘膜；、抗癌作用等多种生物学效应，叶酸还具有明显的抗氧化功能，已引起国际社会的普遍关注。 经科学研究及临床应用证明，叶酸是合成核酸时所需的辅酶，叶酸不足，影响核酸合成，影响正常细 胞分裂与复制。近年来，人们发现天然植物瓦松中含有大量的叶酸，从中提取叶酸并且取得了可喜进展， 由于其原料瓦松为中药，原料来源较广。名称为“从三七叶提取叶酸的方法”的专利中请中便公开了将三 七叶经酸水提取正交试验法优化提取叶酸工艺流程。上述专利文献中的叶酸提取工艺主要是三七叶经过用 酸水加热回流提取，减压干燥等步骤提取而成，其分离效果远远不如大孔吸附树脂处理后在进行硅胶柱层 析分离的效果。

发明内容：

本发明的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种利用大孔吸附树脂富 集纯化瓦松中叶酸的方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种利用大孔吸附树脂富集纯化瓦松中叶酸的方法，其步骤如下：

(1)将干瓦松粉碎后用PH＝4的酸水以料∶水＝1∶12的比例加热回流提取2次，每次2h，合并提取液；

(2)将经(1)处理的瓦松提取液过滤，减压干燥得浸膏状初提物；

(3)将所收获浸膏状初提物用75％乙醇溶解后脱色，脱色液浓缩回收乙醇，得到叶酸的粗提物。

(4)将所得叶酸粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；

(5)用不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集叶酸各阶段洗脱液；

(6)将叶酸各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得叶酸半成品，其含量为35％以上；

(7)将所得叶酸半成品上硅胶层析柱，并以丙酮，甲醇以不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检 测，收集叶酸各阶段洗脱液；

(8)将所收集的叶酸洗脱液，采用活性炭脱色、重结晶方法精制得叶酸，其含量在98％以上。

所述的步骤(1)中，瓦松粉碎后过10～80目筛再用PH＝4的酸水以料∶水＝1∶12的比例加热回流提 取。

在所述的步骤(1)中，调节PH的酸为盐酸，加热回流提取2次，每次2h。

所述的步骤(1)中，加热回流提取的方法为浸泡法、回流提取法、渗漉法、煎煮法、连续提取法中 的一种或一种以上。

所述的步骤(1)中，加入酸水的体积为瓦松粉体积的12倍。

在所述的(3)中，加入乙醇的量按体积计算为提取物水溶液的5～20倍，调节PH值所用的酸为盐酸。

步骤(4)中所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X-5、NKA-9、S-8、D3520、D4006、H103、 D4020、AB-8H和NKA-II型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态吸附。

步骤(5)中所述的洗脱为用10～95％的乙醇进行洗脱。