[发明专利]一种均相多指标荧光/化学发光测定方法及其用途

权利要求书

1.一种均相多指标荧光/化学发光测定方法，其特征在于，用聚苯乙烯微球作为载体结合多种肿瘤标志物的包被抗体，与标准溶液或者血清样品中的相应多种标志物结合后，与分别制备的标记抗体结合，然后与抗地高辛ALP，抗FITC HRP和链酶亲和素量子点标记物结合后，进行化学发光测定或者直接进行荧光测定血清标志物。

2.按权利要求1所述的均相多指标荧光/化学发光测定方法，其特征在于，所述的肿瘤标志物是癌胚抗原CEA、细胞角质素片断19Cyfra21-1和神经元特异性烯醇化酶NSE。

3.按权利要求1所述的均相多指标荧光/化学发光测定方法，其特征在于，所述的制备的标记抗体是生物素化NSE标记抗体，地高辛标记的CEA标记抗体和FITC标记的Cyfra21-1标记抗体。

4.按权利要求1所述的均相多指标荧光/化学发光测定方法，其特征在于，其包括下述步骤：

1)将包被抗体结合到聚苯乙烯微球上制备载体抗体复合物；

2)制备地高辛标记的CEA标记抗体；

3)制备FITC标记的Cyfra21-1标记抗体；

4)制备生物素化的NSE标记抗体；

5)在同一台仪器上同时进行荧光/化学发光测定。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，将步骤1)的抗体复合物混合后，加入含有肿瘤标志物CEA、Cyfra21-1、NSE的标准溶液或者血清样品，于37℃反应1h；

将结合有所述肿瘤标志物的载体抗体复合物洗涤，加入到步骤2，3，4)制成的生物素化NSE标记抗体，地高辛标记的CEA标记抗体和FITC标记的Cyfra21-1标记抗体，于37℃反应1h；

反应后，经洗涤，加入ALP修饰抗地高辛、HRP修饰抗FITC和量子点修饰链酶亲和素，于37℃反应1h；

经洗涤将反应产物平均分为3组，各组加入HRP化学发光底物、ALP化学发光底物进行化学发光测定或者直接进行荧光测定。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是同时进行化学发光与荧光测定。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是，该方法同时检测3种标志物，或同时检测2种或3种以上标志物。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征是该方法使用2种酶标记物和1种荧光量子点，或使用2种以上或少于2种酶标记物或1种或1种以上荧光量子点。

9.一种检测肿瘤多种血清标志物的试剂盒，其特征是，其包括肿瘤标志物标记抗体和聚苯乙烯微球抗体复合物以及酶标记物和荧光量子点。

10.按权利要求9所述的试剂盒，其特征是，所述的肿瘤标志物标记抗体为生物素化NSE标记抗体，地高辛标记的CEA标记抗体和FITC标记的Cyfra21-1标记抗体。