[发明专利]一种细胞负压培养装置及其方法

权利要求书

1.一种细胞负压培养装置，其特征在于，所述装置包括高压气瓶(1)、储液槽(7)、细胞培养用微孔滤膜片(12)、细胞培养槽(13)、以及连接在它们之间的导管和玻璃管、安装在这些管路上的流量阀、泵和膜盒压力仪；

所述高压气瓶(1)通过第一导管(2)连接第二导管(5)，并在第一导管(2)上安装第一流量阀(3)来控制气体的流量，还安装第一膜盒压力仪(4)来显示气体的相关参数；

所述第二导管(5)两端分别连接储液槽(7)和细胞培养槽(13)，并在靠储液槽(7)一端安装蠕动泵(6)，将细胞培养槽(13)中的多余培养基泵回储液槽(7)；所述储液槽(7)的位置高于细胞培养槽(13)，在储液槽(7)底部与细胞培养槽(13)之间连接玻璃管(10)，在储液槽(7)的上部接出第三导管(8)，并在玻璃管(10)和第三导管(8)上分别安装有第二流量阀(11)和第一过滤器(9)，第二流量阀(11)控制细胞培养槽(13)中的液面的高低，第一过滤器(9)控制储液槽(7)气液界面的高度；

所述细胞培养用微孔滤膜片(12)放置在细胞培养槽(13)内，从细胞培养槽(13)接出第四导管(16)，在第四导管(16)上安装有第二膜盒压力仪(14)显示细胞培养槽内气压，安装第二过滤器(15)过滤空气，并安装有微型真空泵(17)来控制细胞培养槽中的真空度；

所述细胞培养槽(13)内设置有细胞培养用微孔滤膜片支撑架(18)，细胞培养用微孔滤膜片(12)放置于其上。

2.根据权利要求1所述的细胞负压培养装置，其特征在于，所述细胞培养槽(13)是使用聚碳酸酯制作的透明槽，并且制作成楔形，在保证培养基体积的条件下，降低细胞与培养槽底的高度。

3.根据权利要求1所述的细胞负压培养装置，其特征在于，所述第一和第二过滤器都是0.22um过滤器。

4.根据权利要求1所述的细胞负压培养装置，其特征在于，所述储液槽(7)、细胞培养槽(13)均为圆柱形，第一、二、三、四导管均为硅胶管。

5.使用权利要求1-4之任一项细胞负压培养装置进行细胞培养的方法，按以下步骤进行：

(1)接种和粘附

先在细胞培养槽(13)中注入超过微孔滤膜片(12)的培养基，将细胞接种在细胞培养用微孔滤膜片(12)上，等细胞贴壁后将其细胞面朝上放入细胞培养用微孔滤膜片支撑架(18)上；

(2)液面的调节

分别通过调节安装在储液槽(7)下端的蠕动泵(6)和第二流量阀(11)来调节进出细胞培养槽(13)中的液面，控制液面高度在细胞培养用微孔滤膜片(12)上层，使培养的细胞处于气液界面上；

(3)气压的调节

根据第二膜盒压力仪(14)显示的细胞培养槽内气压，通过微型真空泵(17)来控制细胞培养槽中的真空度；

(4)细胞的观察

通过显微镜观察细胞的形态和生长趋势；

(5)取样并检测

按照实验设计实时取样检测细胞的物理、化学、生物学行为。

6.使用权利要求1-4之任一项细胞负压培养装置进行细胞培养的方法，按以下步骤进行：

(1)接种和粘附

先在细胞培养槽(13)中注入超过微孔滤膜片(12)的培养基，将细胞接种在细胞培养用微孔滤膜片(12)上，等细胞贴壁后将其细胞面朝下放入细胞培养用微孔滤膜片支撑架(18)上，然后接种另外的细胞进行细胞共培养；

(2)液面的调节

分别通过调节安装在储液槽(7)下端的蠕动泵(6)和第二流量阀(11)来调节进出细胞培养槽(13)中的液面，控制液面高度在细胞培养用微孔滤膜片(12)上层，使培养的细胞处于气液界面上；

(3)气压的调节

根据第二膜盒压力仪(14)显示的细胞培养槽内气压，通过微型真空泵(17)来控制细胞培养槽中的真空度；

(4)细胞的观察

通过显微镜观察细胞的形态和生长趋势；

(5)取样并检测

按照实验设计实时取样检测细胞的物理、化学、生物学行为。